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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】如何算摩尔吸光系数
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zhangy8627

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫温暖我的心！

[交流] 【求助】如何算摩尔吸光系数 已有3人参与

已经有了紫外吸收图，但是为了让几种物质的检测波长统一，需要知道这几种物质在哪个波长下的摩尔吸光系数最大，我不会算。想麻烦哪位知道，告诉我一下。呵呵
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1楼 2010-11-21 23:27:02
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sylgdxdong

木虫 (正式写手)

用公式

★ ★
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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-23 08:54:48
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Originally posted by zhangy8627 at 2010-11-21 23:27:02:
已经有了紫外吸收图，但是为了让几种物质的检测波长统一，需要知道这几种物质在哪个波长下的摩尔吸光系数最大，我不会算。想麻烦哪位知道，告诉我一下。呵呵

用A=Kbc计算

A吸光度值
b光程长度（比色皿厚度）
C浓度
当C为1摩尔每升时，K就是摩尔吸收系数
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2楼2010-11-22 03:12:04
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zhangy8627

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫温暖我的心！
引用回帖:
Originally posted by sylgdxdong at 2010-11-22 03:12:04:

用A=Kbc计算

A吸光度值
b光程长度（比色皿厚度）
C浓度
当C为1摩尔每升时，K就是摩尔吸收系数

谢谢你的回答，如果浓度不明怎么办？我测紫外时，为了让紫外图好看，而溶液浓度有点大，我就稀释了再检测的。所以浓度我就不知道。
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3楼2010-11-22 10:03:15
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polymerfox

木虫 (初入文坛)
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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-23 08:55:04
其实如果要知道在那个波长吸收最大，不需要知道具体的吸光系数，只需要在一定范围内扫一下，看一下在哪个波长吸收最大就可以了，比如氨基酸就在280nm有最大值、核酸在260nm有最大值。
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4楼2010-11-22 10:18:22
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zhangy8627

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫温暖我的心！
引用回帖:
Originally posted by polymerfox at 2010-11-22 10:18:22:
其实如果要知道在那个波长吸收最大，不需要知道具体的吸光系数，只需要在一定范围内扫一下，看一下在哪个波长吸收最大就可以了，比如氨基酸就在280nm有最大值、核酸在260nm有最大值。

谢谢你的回复，我是测好几种物质，拿紫外当检测器，最好这几种物质能统一波长，但是每种物质的最大吸收波长都不在一起，所以要用摩尔吸收系数来确定一个最适波长。找到一个波长让每种物质的吸收都能尽量达到最大。
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5楼2010-11-22 21:53:32
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polymerfox

木虫 (初入文坛)
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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-23 08:55:20
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Originally posted by zhangy8627 at 2010-11-22 21:53:32:



谢谢你的回复，我是测好几种物质，拿紫外当检测器，最好这几种物质能统一波长，但是每种物质的最大吸收波长都不在一起，所以要用摩尔吸收系数来确定一个最适波长。找到一个波长让每种物质的吸收都能尽量达到 ...

测紫外的目的是什么？是他们的含量、比例还是只需要检测出他们的存在？如果要测含量，还是需要用知道具体浓度的标准溶液作标准曲线的。

[ Last edited by polymerfox on 2010-11-22 at 22:18 ]
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6楼2010-11-22 22:14:32
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zhangy8627

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫温暖我的心！
引用回帖:
Originally posted by polymerfox at 2010-11-22 22:14:32:


测紫外的目的是什么？是他们的含量、比例还是只需要检测出他们的存在？如果要测含量，还是需要用知道具体浓度的标准溶液作标准曲线的。

[ Last edited by polymerfox on 2010-11-22 at 22:18 ]

检测出他们的存在，和含量。用HPLC，用的是紫外，没有二极管阵列。
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7楼2010-11-22 22:37:16
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polymerfox

木虫 (初入文坛)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-23 08:55:33
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Originally posted by zhangy8627 at 2010-11-22 22:37:16:



检测出他们的存在，和含量。用HPLC，用的是紫外，没有二极管阵列。

原来是色谱与紫外联用。。。
如果你要测的样品中各种物质在HPLC中能够完全分离，那我建议干脆直接做几次HPLC，每次用不同的波长，看看哪一个波长下谱图效果好。。。
而且你要测浓度，还是得用各个物质的标准溶液作标曲（就是测出各个物质在不同浓度下对应的响应值）

[ Last edited by polymerfox on 2010-11-22 at 23:47 ]
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8楼2010-11-22 23:44:34
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zhangy8627

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫温暖我的心！
引用回帖:
Originally posted by polymerfox at 2010-11-22 23:44:34:


原来是色谱与紫外联用。。。
如果你要测的样品中各种物质在HPLC中能够完全分离，那我建议干脆直接做几次HPLC，每次用不同的波长，看看哪一个波长下谱图效果好。。。
而且你要测浓度，还是得用各个物质的标准 ...

谢谢你，你给的建议很中肯，我已经这么做了，只是老师觉得我应该算下摩尔吸收系数，所以，我才想问问！
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9楼2010-11-23 00:17:34
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