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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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zhangy8627

铁杆木虫 (著名写手)

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[交流] 【求助】如何算摩尔吸光系数 已有3人参与

已经有了紫外吸收图,但是为了让几种物质的检测波长统一,需要知道这几种物质在哪个波长下的摩尔吸光系数最大,我不会算。想麻烦哪位知道,告诉我一下。呵呵
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sylgdxdong

木虫 (正式写手)

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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-23 08:54:48
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Originally posted by zhangy8627 at 2010-11-21 23:27:02:
已经有了紫外吸收图,但是为了让几种物质的检测波长统一,需要知道这几种物质在哪个波长下的摩尔吸光系数最大,我不会算。想麻烦哪位知道,告诉我一下。呵呵

用A=Kbc计算

A吸光度值
b光程长度(比色皿厚度)
C浓度
当C为1摩尔每升时,K就是摩尔吸收系数
2楼2010-11-22 03:12:04
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zhangy8627

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫温暖我的心!

引用回帖:
Originally posted by sylgdxdong at 2010-11-22 03:12:04:

用A=Kbc计算

A吸光度值
b光程长度(比色皿厚度)
C浓度
当C为1摩尔每升时,K就是摩尔吸收系数

谢谢你的回答,如果浓度不明怎么办?我测紫外时,为了让紫外图好看,而溶液浓度有点大,我就稀释了再检测的。所以浓度我就不知道。
3楼2010-11-22 10:03:15
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polymerfox

木虫 (初入文坛)

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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-23 08:55:04
其实如果要知道在那个波长吸收最大,不需要知道具体的吸光系数,只需要在一定范围内扫一下,看一下在哪个波长吸收最大就可以了,比如氨基酸就在280nm有最大值、核酸在260nm有最大值。
4楼2010-11-22 10:18:22
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zhangy8627

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫温暖我的心!

引用回帖:
Originally posted by polymerfox at 2010-11-22 10:18:22:
其实如果要知道在那个波长吸收最大,不需要知道具体的吸光系数,只需要在一定范围内扫一下,看一下在哪个波长吸收最大就可以了,比如氨基酸就在280nm有最大值、核酸在260nm有最大值。

谢谢你的回复,我是测好几种物质,拿紫外当检测器,最好这几种物质能统一波长,但是每种物质的最大吸收波长都不在一起,所以要用摩尔吸收系数来确定一个最适波长。找到一个波长让每种物质的吸收都能尽量达到最大。
5楼2010-11-22 21:53:32
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polymerfox

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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-23 08:55:20
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Originally posted by zhangy8627 at 2010-11-22 21:53:32:



谢谢你的回复,我是测好几种物质,拿紫外当检测器,最好这几种物质能统一波长,但是每种物质的最大吸收波长都不在一起,所以要用摩尔吸收系数来确定一个最适波长。找到一个波长让每种物质的吸收都能尽量达到 ...

测紫外的目的是什么?是他们的含量、比例还是只需要检测出他们的存在?如果要测含量,还是需要用知道具体浓度的标准溶液作标准曲线的。

[ Last edited by polymerfox on 2010-11-22 at 22:18 ]
6楼2010-11-22 22:14:32
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zhangy8627

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫温暖我的心!

引用回帖:
Originally posted by polymerfox at 2010-11-22 22:14:32:


测紫外的目的是什么?是他们的含量、比例还是只需要检测出他们的存在?如果要测含量,还是需要用知道具体浓度的标准溶液作标准曲线的。

[ Last edited by polymerfox on 2010-11-22 at 22:18 ]

检测出他们的存在,和含量。用HPLC,用的是紫外,没有二极管阵列。
7楼2010-11-22 22:37:16
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polymerfox

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Originally posted by zhangy8627 at 2010-11-22 22:37:16:



检测出他们的存在,和含量。用HPLC,用的是紫外,没有二极管阵列。

原来是色谱与紫外联用。。。
如果你要测的样品中各种物质在HPLC中能够完全分离,那我建议干脆直接做几次HPLC,每次用不同的波长,看看哪一个波长下谱图效果好。。。
而且你要测浓度,还是得用各个物质的标准溶液作标曲(就是测出各个物质在不同浓度下对应的响应值)

[ Last edited by polymerfox on 2010-11-22 at 23:47 ]
8楼2010-11-22 23:44:34
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zhangy8627

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小木虫温暖我的心!

引用回帖:
Originally posted by polymerfox at 2010-11-22 23:44:34:


原来是色谱与紫外联用。。。
如果你要测的样品中各种物质在HPLC中能够完全分离,那我建议干脆直接做几次HPLC,每次用不同的波长,看看哪一个波长下谱图效果好。。。
而且你要测浓度,还是得用各个物质的标准 ...

谢谢你,你给的建议很中肯,我已经这么做了,只是老师觉得我应该算下摩尔吸收系数,所以,我才想问问!
9楼2010-11-23 00:17:34
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