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酸奶一号

银虫 (小有名气)

[求助] 吸光值怎么一直是负值

是这样子的,我测定的是牛奶超滤上清液中的可溶性磷含量,用的是GB中的磷钼蓝分光光度法,标准曲线和空白测定都没问题,但一到样品测定吸光值就是负值,并且有“low”标记,然后我用负吸光值换算出来的可溶性磷含量却居然和理论值相符,问题来了:
1、为什么老是出现负值,测定总磷时没有出现过,已经做过两次,都是负值,并且用肉眼明显能看出样品比空白的蓝色要深呀,这是什么原因造成的呢?困扰中
2、负吸光值下的测定值能否用,若不能,怎么换算过来却如此接近呢?
感谢各位虫友们踊跃解答,真正能够解决问题的还可以追加金币,谢谢.
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


小损样儿(金币+1): 鼓励专家顾问应助…… 2011-06-10 13:07:21
酸奶一号(金币+2): 2011-06-10 15:52:00
将标样空白的吸光值与出现负浓度值的样品的吸光值比较一下
呵呵 最大的可能性是不是楼主少拉半格啊 机器的可能性小些 侧重排除下人为因素?
太胖了!~
2楼2011-06-10 13:03:43
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酸奶一号

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by hsd3521 at 2011-06-10 13:03:43:
将标样空白的吸光值与出现负浓度值的样品的吸光值比较一下
呵呵 最大的可能性是不是楼主少拉半格啊 机器的可能性小些 侧重排除下人为因素?

谢谢回答,我已经找到原因了,呵呵
DNA-RNA-dsRNA-ssRNA-cDNAs
3楼2011-06-10 15:51:50
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wynwyd2009

铁虫 (初入文坛)

你好,请教一下。我测总磷时,样品没有沉淀,最后测吸光度时溶液出现浑浊,颜色偏灰,空白也是如此。所有试剂都是新配的,不知道哪里出了问题。求解决,感激不尽!
4楼2011-06-29 00:41:55
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酸奶一号

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wynwyd2009 at 2011-06-29 00:41:55:
你好,请教一下。我测总磷时,样品没有沉淀,最后测吸光度时溶液出现浑浊,颜色偏灰,空白也是如此。所有试剂都是新配的,不知道哪里出了问题。求解决,感激不尽!

你好,不知道你测定什么样品中的磷,不管什么样品,前期都需要进行消解处理,我是用的微波消解,并且参照2003GB-磷钼蓝分光光度法,但是配钼酸铵时GB中是0.5g钼酸铵,实际应该是5g,同时注意自己选用的是P标品还是PO4标品,否则要进行换算的。至于反应的颜色显然应该是淡蓝色或深蓝色,根据物质磷含量。现在我测的牛奶中的磷挺准确的,没有问题,你可以试试...注意前期消解很重要,否则是测不准的...
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5楼2011-06-29 12:22:02
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haha5151983

银虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 酸奶一号 at 2011-06-10 15:51:50:
谢谢回答,我已经找到原因了,呵呵

不好意思,请问你找到答案是什么样的呢?具体是什么原因?因为我做检测的时候也会出现类似的情况的。
6楼2011-07-09 09:29:33
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酸奶一号

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by haha5151983 at 2011-07-09 09:29:33:
不好意思,请问你找到答案是什么样的呢?具体是什么原因?因为我做检测的时候也会出现类似的情况的。

如果是出现负值的情况,原因有很多种,百度里一搜就可以,但毕竟因人而异,我当时之所以出现负值,是自己马虎大意把一个样品反应样错误的当成了空白,因此出现负值,后来才发现弄错了...
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7楼2011-07-09 17:27:31
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cynthia.ni

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1738765楼: Originally posted by 酸奶一号 at 2011-06-29 12:22:02:
你好,不知道你测定什么样品中的磷,不管什么样品,前期都需要进行消解处理,我是用的微波消解,并且参照2003GB-磷钼蓝分光光度法,但是配钼酸铵时GB中是0.5g钼酸铵,实际应该是5g,同时注意自己选用的是P标品还 ...

你确定是要加五克钼酸铵配成溶液吗???那硫酸的浓度需要改变吗?
8楼2012-05-19 11:15:16
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yang4677532

新虫 (小有名气)

引用回帖:
1738765楼: Originally posted by 酸奶一号 at 2011-06-29 12:22:02
你好,不知道你测定什么样品中的磷,不管什么样品,前期都需要进行消解处理,我是用的微波消解,并且参照2003GB-磷钼蓝分光光度法,但是配钼酸铵时GB中是0.5g钼酸铵,实际应该是5g,同时注意自己选用的是P标品还是 ...

请问为什么要用5g的钼酸铵啊?我也做2003GB-磷钼蓝分光光度法,但是比色之前的溶液的蓝色,会随着时间的延长而蓝色加深,所以测出来的值不准,请问这是为什么啊?
9楼2012-06-12 23:01:45
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西门踽

铁虫 (正式写手)

水手的秘书

我最近也用这个方法测有机物中的p量,也出问题了,在660nm处吸光值是平平的,最大吸收在334nm附近,一直找不到原因,仪器要特殊设定吗?我设置的扫描范围是300nm—700nm。
刻在书桌上的是我的幼稚,刻在心里的是我的偏执
10楼2012-11-19 15:21:39
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