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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白的最大吸收问题
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芝之

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】蛋白的最大吸收问题 已有4人参与

一般都是在紫外280nm处有吸收，我是以蛋白为目标，但是有一次调错了吸光度，在260处测的吸收值，我发现比280的吸收值还大，求高人这一现象，是我的蛋白不纯，还是蛋白也是有可能在260处有很大吸收（我硫酸铵沉淀的粗蛋白是棕色的溶液，我是做分离纯化的）
小女子这厢有礼了，谢谢~
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1楼 2010-06-01 08:51:48
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yaojc

木虫 (正式写手)
★
芝之(金币+1):谢谢参与
芝之(金币+1):谢谢 2010-06-01 09:10:00
经验公式1.44*A280-0.75*A260
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专注、专心、专业
2楼2010-06-01 09:00:59
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看天

木虫 (知名作家)
★
芝之(金币+1):谢谢参与
芝之(金币+1):谢谢 2010-06-07 13:23:41
测定混合物不是以吸光度最大的那个波长测定的 因为不同的物质摩尔吸光系数不同 你如果是纯蛋白就知道了
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
3楼2010-06-01 09:14:14
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ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
芝之(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-06-01 16:48:13
芝之(金币+1):非常感谢 2010-06-04 09:46:32
280nm只是Phe，Tyr，Trp里苯环的吸收波长，不是蛋白质整体的吸光效应

280nm吸光度能用于蛋白浓度测定是基于这三种氨基酸在蛋白中普遍存在并且含量基本一致这一假设

蛋白的其余结构在260可能也会有吸收，再加上杂质引起的吸收，有可能导致260比280吸光值大
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4楼2010-06-01 09:56:08
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mmy2006

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
做个吸收光谱，看看最大吸收波长在哪里
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5楼2010-06-08 17:44:32
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