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guochuan104

新虫 (初入文坛)

[求助] 大家帮我看看DNA是不是断裂了?

小妹我昨天CTAB方法提取了收集的环境样品DNA,而且加了RNA酶哦,70%乙醇洗涤后得到一块棕黑色的物质,加100ulTE居然没能完全溶解,用1ul跑胶之后发现点样孔没有荧光,亮带都在最下面,请问各位大侠,DNA是不是全部断裂了呢?上图
我还有必要用338-518PCR看看么?

201305171006.jpg



201305171008.jpg



GCAdministrator 2013-05-17 10 时 57 分.jpg

[ Last edited by guochuan104 on 2013-5-17 at 12:49 ]
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guochuan104

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiadongliang at 2013-05-17 14:09:40
这种DNA肯定不能用于PCR扩增。
必须纯化后才有可能PCR扩增成功。
你的RNA酶没有起到作用,在这种状态下,RNA应该失活了。

那应该怎么纯化呢?我做这个实验提DNA折腾得快要疯掉了~求赐教~
3楼2013-05-17 15:53:44
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xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
guochuan104: 金币+5, ★★★很有帮助, 我刚做上PCR~~ 2013-05-17 15:51:30
laozuzunzhe: 金币+4, good! 2013-05-17 23:00:11
这种DNA肯定不能用于PCR扩增。
必须纯化后才有可能PCR扩增成功。
你的RNA酶没有起到作用,在这种状态下,RNA应该失活了。
2楼2013-05-17 14:09:40
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xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

采用DNA切胶纯化试剂盒对你的DNA进行纯化吧。
这样纯化的DNA会更好。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2013-05-17 16:21:37
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guochuan104

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiadongliang at 2013-05-17 16:21:37
采用DNA切胶纯化试剂盒对你的DNA进行纯化吧。
这样纯化的DNA会更好。

好哒,我跟老板商量商量~
5楼2013-05-17 16:27:55
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