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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大家帮我看看DNA是不是断裂了？
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guochuan104

新虫 (初入文坛)

[求助] 大家帮我看看DNA是不是断裂了？

小妹我昨天CTAB方法提取了收集的环境样品DNA，而且加了RNA酶哦，70%乙醇洗涤后得到一块棕黑色的物质，加100ulTE居然没能完全溶解，用1ul跑胶之后发现点样孔没有荧光，亮带都在最下面，请问各位大侠，DNA是不是全部断裂了呢？上图
我还有必要用338-518PCR看看么？

201305171006.jpg



201305171008.jpg



GCAdministrator 2013-05-17 10 时 57 分.jpg

[ Last edited by guochuan104 on 2013-5-17 at 12:49 ]
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1楼 2013-05-17 12:46:10
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xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guochuan104: 金币+5, ★★★很有帮助, 我刚做上PCR~~ 2013-05-17 15:51:30
laozuzunzhe: 金币+4, good！ 2013-05-17 23:00:11
这种DNA肯定不能用于PCR扩增。
必须纯化后才有可能PCR扩增成功。
你的RNA酶没有起到作用，在这种状态下，RNA应该失活了。
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2楼2013-05-17 14:09:40
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guochuan104

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiadongliang at 2013-05-17 14:09:40
这种DNA肯定不能用于PCR扩增。
必须纯化后才有可能PCR扩增成功。
你的RNA酶没有起到作用，在这种状态下，RNA应该失活了。

那应该怎么纯化呢？我做这个实验提DNA折腾得快要疯掉了~求赐教~
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3楼2013-05-17 15:53:44
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xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

采用DNA切胶纯化试剂盒对你的DNA进行纯化吧。
这样纯化的DNA会更好。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

guochuan104
4楼2013-05-17 16:21:37
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guochuan104

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiadongliang at 2013-05-17 16:21:37
采用DNA切胶纯化试剂盒对你的DNA进行纯化吧。
这样纯化的DNA会更好。

好哒，我跟老板商量商量~
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5楼2013-05-17 16:27:55
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