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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 酶种类的确定
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shasha沙

铜虫 (小有名气)

[求助] 酶种类的确定

分离假单胞菌降解污染物的上清液，使用ABTS的方法测定了漆酶酶活，发现有漆酶酶活大约在100U/L左右，但是蛋白含量较低在10mg/L左右，有时候用考马斯蓝的方法还测不到蛋白。使用3K大小的超滤管浓缩，小于3K的部分的漆酶酶活与原来未浓缩的部分的漆酶酶活大小差不多~这说明活性都在小于3K的部分吗？小于3K的酶都有什么酶啊？有什么干扰物质吗
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1楼 2013-05-17 11:33:38
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
shasha沙(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-17 14:25:33
要注意：使用3K大小的超滤管浓缩，穿透的蛋白也就是你说的小于3K的部分并不是分子量一定小于3KD。所以你说的小于3K的酶这个前提就有错误。
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2楼2013-05-17 14:14:18
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shasha沙

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2013-05-17 14:14:18
要注意：使用3K大小的超滤管浓缩，穿透的蛋白也就是你说的小于3K的部分并不是分子量一定小于3KD。所以你说的小于3K的酶这个前提就有错误。

嗯，我也注意到了这一点，但是酶活大部分集中在膜下面的部分，这个怎么解释呢？是不是不是酶的作用？
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3楼2013-05-17 14:42:34
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
shasha沙: 金币+3, ★有帮助 2013-05-20 09:54:39
shasha沙: 金币+6, ★有帮助 2013-05-26 10:59:45
引用回帖:
3楼: Originally posted by shasha沙 at 2013-05-17 14:42:34
嗯，我也注意到了这一点，但是酶活大部分集中在膜下面的部分，这个怎么解释呢？是不是不是酶的作用？...

如果真的是这么小的分子，那肯定不是酶的作用。你做个试验确认下是不是酶的作用，比如蛋白质沉淀后取上清测活性。
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4楼2013-05-17 19:01:13
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shasha沙

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lxj341401 at 2013-05-17 19:01:13
如果真的是这么小的分子，那肯定不是酶的作用。你做个试验确认下是不是酶的作用，比如蛋白质沉淀后取上清测活性。...

测小于3K的部分有漆酶酶活的话，是受什么影响的可能性比较大呢？过氧化氢还是其他什么物质？
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5楼2013-05-20 09:55:50
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shasha沙

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lxj341401 at 2013-05-17 19:01:13
如果真的是这么小的分子，那肯定不是酶的作用。你做个试验确认下是不是酶的作用，比如蛋白质沉淀后取上清测活性。...

我做过煮沸5min的对照试验，没有活性，也没有降解性~用蛋白酶K是不是也可以验证是不是蛋白质在起作用？
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6楼2013-05-26 11:01:20
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