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【求助/交流】淀粉水解实验已有4人参与
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前两天做链霉菌的淀粉水解实验,加了碘液后发现有的菌菌落周围没有透明圈,都是蓝色的,可今天一看,那些没有透明圈的菌周围变成白色了,这是怎么回事?是这些菌能够水解淀粉呢?还是碘液挥发了?请有经验的人指点。 是不是能在淀粉培养基上长的菌都能分解淀粉,即可以产生淀粉酶呢? |
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dhd997
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2楼2010-06-02 11:28:08
freshblack
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3楼2010-06-02 15:39:18
冼亮淀粉酶
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scelab(金币+7):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-06-02 22:30:24
scelab(金币+7):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-06-02 22:30:24
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这种现象我遇到过,刚染色的时候没有降解圈,等过夜了就有了。我认为是淀粉酶造成的,因为碘和淀粉反应是非常灵敏的,极少有可能出错。随着培养基不同,颜色消退的速度也不同,比如LB培养基碘染后颜色极快消退,但是我现在用的培养基即使放三天也不消退,这是培养基组分不同。看楼主的样子应该不是培养基组分的原因。 当然,淀粉酶属于诱导酶,但即使是诱导酶也是可以有少量表达的,这个不用怀疑,属于所谓的本底表达,只是说有淀粉诱导之后更容易表达而已。当然了,能在淀粉平板上生长的微生物不一定会表达淀粉酶,因为平板里还可能有别的营养物质,比如说我使用的培养基就有胰蛋白胨。但是可以确定的是产生降解圈就肯定是有淀粉酶表达,因为碘染的灵敏度非常高。 楼主刚开始碘染时没有降解圈,放置一段时间后又有了降解圈,但是没有说是不是整块平板都变白了。如果是整块变白就是培养基组分的问题,不利于碘染络合物存在。如果是只在菌落周围出现降解圈,我认为可能是微生物产淀粉酶种类问题。众所周之,淀粉酶不止一种,淀粉和碘的络合物随着分子链长度不同颜色也不同,每种淀粉酶的降解效果是不同的,酶的性质不同,加上微生物在平板上表达淀粉酶受很多因素影响,造成菌落周围淀粉降解物不同,络合物的颜色也不同,加上即使是碘染后,淀粉酶还是可以继续作用的,所以造成碘染效果比较隐晦,出现比较明显的效果需要时间积累。 不用怀疑,有圈就是有酶。不过值得注意的是,固体跟液体培养方式不同,产酶状况也有可能不同,圈大的微生物液体培养酶活力不一定高。 |

4楼2010-06-02 20:03:18
冼亮淀粉酶
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5楼2010-06-02 20:06:32
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