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【求助/交流】淀粉水解实验 已有4人参与
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前两天做链霉菌的淀粉水解实验，加了碘液后发现有的菌菌落周围没有透明圈，都是蓝色的，可今天一看，那些没有透明圈的菌周围变成白色了，这是怎么回事？是这些菌能够水解淀粉呢?还是碘液挥发了？请有经验的人指点。 是不是能在淀粉培养基上长的菌都能分解淀粉，即可以产生淀粉酶呢？ |
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2楼2010-06-02 11:28:08
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这种现象我遇到过，刚染色的时候没有降解圈，等过夜了就有了。我认为是淀粉酶造成的，因为碘和淀粉反应是非常灵敏的，极少有可能出错。随着培养基不同，颜色消退的速度也不同，比如LB培养基碘染后颜色极快消退，但是我现在用的培养基即使放三天也不消退，这是培养基组分不同。看楼主的样子应该不是培养基组分的原因。 当然，淀粉酶属于诱导酶，但即使是诱导酶也是可以有少量表达的，这个不用怀疑，属于所谓的本底表达，只是说有淀粉诱导之后更容易表达而已。当然了，能在淀粉平板上生长的微生物不一定会表达淀粉酶，因为平板里还可能有别的营养物质，比如说我使用的培养基就有胰蛋白胨。但是可以确定的是产生降解圈就肯定是有淀粉酶表达，因为碘染的灵敏度非常高。 楼主刚开始碘染时没有降解圈，放置一段时间后又有了降解圈，但是没有说是不是整块平板都变白了。如果是整块变白就是培养基组分的问题，不利于碘染络合物存在。如果是只在菌落周围出现降解圈，我认为可能是微生物产淀粉酶种类问题。众所周之，淀粉酶不止一种，淀粉和碘的络合物随着分子链长度不同颜色也不同，每种淀粉酶的降解效果是不同的，酶的性质不同，加上微生物在平板上表达淀粉酶受很多因素影响，造成菌落周围淀粉降解物不同，络合物的颜色也不同，加上即使是碘染后，淀粉酶还是可以继续作用的，所以造成碘染效果比较隐晦，出现比较明显的效果需要时间积累。 不用怀疑，有圈就是有酶。不过值得注意的是，固体跟液体培养方式不同，产酶状况也有可能不同，圈大的微生物液体培养酶活力不一定高。 |
4楼2010-06-02 20:03:18
冼亮淀粉酶
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