应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求教PCR引物设计的相关问题
51/1返回列表
查看: 868  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

飘雪3889

木虫 (小有名气)

[求助] 求教PCR引物设计的相关问题

要设计简并引物，求教各位的经验
实验目的是要从某真核微生物中找到酶的基因序列，再克隆表达。这个酶的基因序列未知，打算从其他物种里面的同种酶来设计简并引物。在选择上，是必须要从亲缘关系很近的物种找起吗？我这个酶所具有的催化效果，在真核微生物里面报道得不多，植物里面倒是很多见。另外，有哪些公司是专业设计这个的，麻烦大家多告诉我一下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-05-01 23:17:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
飘雪3889(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-05-02 12:05:13
1，找到亲缘关系较近的其他真核生物（尽量多找）
2，去NCBI上查找这些真核生物，看看有没有你所需酶的基因序列
3，拿到这些真核生物酶的基因序列，在DNAMAN上比对，对照简并表，设计引物。


不过我以前做的片段太长了，简并引物扩不出来，后来还是现在保守序列那里设计特异性引物，然后做了RACE。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-05-02 10:04:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dafeizizhu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-05-02 12:05:24
想要那到一个基因的序列，大多数情况是用RACE，想要通过一次PCR就得到，那RACE技术就可以退出了。在保守区设计简并引物，如上楼所述就行，要有多对，引物越多机会越大，5-6对挺好。买个takara  RACE就行了。前提是要有好的RNA。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

飘雪3889
3楼2013-05-02 10:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘雪3889

木虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by dafeizizhu at 2013-05-02 10:25:51
想要那到一个基因的序列，大多数情况是用RACE，想要通过一次PCR就得到，那RACE技术就可以退出了。在保守区设计简并引物，如上楼所述就行，要有多对，引物越多机会越大，5-6对挺好。买个takara  RACE就行了。前提是要 ...

若不是只找一个基因呢？找具有特定催化效果的多个基因。
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-02 19:32:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dafeizizhu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
飘雪3889(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-07 16:51:02
引用回帖:
4楼: Originally posted by 飘雪3889 at 2013-05-02 19:32:07
若不是只找一个基因呢？找具有特定催化效果的多个基因。...

那你是不是比较这些具有催化效果的多个基因的差别，或者是他们的多态性？如果是这样的话，我建议你看看我给你讲的第一个例子。这样只能在两端进行设计引物，不是很好找的，你可以从相关文献找找看，看是否有人设计过这类的引物，如果有现成的，那真是恭喜你了。
赞一下 回复此楼
5楼2013-05-07 15:46:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 飘雪3889 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂 +8 小蜡新笔 2026-03-26 8/400 2026-03-26 16:18 by dick_runner
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +17 tcxiaoxx 2026-03-20 19/950 2026-03-26 16:04 by 不吃魚的貓
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +5 曼111 2026-03-24 6/300 2026-03-26 13:04 by 13756423260
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 08工学调剂 +13 用户573181 2026-03-20 18/900 2026-03-25 22:00 by zbssa
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 考研调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭