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载体上临近的两个酶切位点可以设计起来做双酶切吗?
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longyh6411
金虫
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专业: 昆虫学
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]
载体上临近的两个酶切位点可以设计起来做双酶切吗?
载体上临近的两个酶切位点可以设计起来做双酶切吗?我没别的选择了,只能选挨着的
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1楼
2013-04-23 21:25:47
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...山雨
新虫
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专业: 昆虫学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
这样子不好,酶切的效果好需要一定长度是保护碱基,挨着的位点切不动,分步切的话,buffer不一样,效果也非常一般,建议在引物上加酶切位点,这样就不受载体的限制了。
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9楼
2013-04-26 16:49:41
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酶切专家
金虫
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专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
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2013-04-24 20:20:08
这的看具体情况,一般来说,不建议用紧邻的两个酶切位点,可能影响其中一个的酶切效率。但也需要具体情况来分析,如果可能,将你的具体序列发上来,大家帮你分析
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2楼
2013-04-23 21:46:31
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银虫
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专业: 基因表达调控与表观遗传学
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流
2013-04-23 21:58:19
什么酶切位点?把序列发上来。
做是可以,不过建议酶切后用CIAP处理,以防止里面的单酶切片段自连。
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3楼
2013-04-23 21:54:19
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cicelyzh
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2013-04-24 20:20:22
要根据距离和哪种限制酶的情况而定。有些能切开,有些不行。
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4楼
2013-04-24 03:59:14
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