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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 原生质体计数
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天马0825

银虫 (小有名气)

[求助] 原生质体计数

各位虫友，我现在在做曲霉原生质体，请问在不染色的情况下，如何在光学显微镜下区别原生质体和孢子呢？
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自信加努力成就人生
1楼 2013-04-08 20:44:24
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1921952610

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也在做类似的实验。同样的疑问。顶起来。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-04-09 08:41:51
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l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖 2013-04-13 22:19:08
用微分干涉显微镜看，主要区别在形态上，不染色的话
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相信自己
3楼2013-04-09 10:15:52
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天马0825

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by l68266152 at 2013-04-09 10:15:52
用微分干涉显微镜看，主要区别在形态上，不染色的话

谢谢，我们实验室只有光学的，我用的次数多，不想麻烦去找别的实验室。文献上我见好多都用的光学进行计数，但是我感觉形态上不好区分，尤其是刚制备的原生质体大小跟孢子差不多。边缘也不是很好区分唉。
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自信加努力成就人生
4楼2013-04-09 15:23:45
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lcat

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助！ 2013-04-11 17:15:41
我们的情况是：孢子有深色的细胞壁，比较厚实，光镜下像一个圆环。原生质体比较大，因为没有了细胞壁，感觉比较虚，像一个气球，有的中间还有空泡。如果玻片里水多的话，感觉原生质体更容易漂动。

另外，我们是用菌丝做的原生质体，几乎没有孢子存在。
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5楼2013-04-10 11:24:50
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天马0825

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lcat at 2013-04-10 11:24:50
我们的情况是：孢子有深色的细胞壁，比较厚实，光镜下像一个圆环。原生质体比较大，因为没有了细胞壁，感觉比较虚，像一个气球，有的中间还有空泡。如果玻片里水多的话，感觉原生质体更容易漂动。

另外，我们是用 ...

你好，那要是用菌丝培养，几乎没有孢子的话，那再生时岂不是低渗里什么也长不出来了？
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6楼2013-04-10 21:26:17
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lcat

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 天马0825 at 2013-04-10 21:26:17
你好，那要是用菌丝培养，几乎没有孢子的话，那再生时岂不是低渗里什么也长不出来了？...

对，做得好的话低渗培养基上长的很少。现在也不做低渗了，做好原生质体直接用。
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7楼2013-04-10 22:28:11
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天马0825

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lcat at 2013-04-10 22:28:11
对，做得好的话低渗培养基上长的很少。现在也不做低渗了，做好原生质体直接用。...

谢谢你，还有个疑问，那要是低渗里长不出东西，那再生率也就无从计算了啊。我现在做了三遍了，只有一次低渗里长出了菌落，其他都没有，所以无从计算再生率。。。
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8楼2013-04-12 09:39:41
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lcat

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 天马0825 at 2013-04-12 09:39:41
谢谢你，还有个疑问，那要是低渗里长不出东西，那再生率也就无从计算了啊。我现在做了三遍了，只有一次低渗里长出了菌落，其他都没有，所以无从计算再生率。。。...

不客气 呵呵。这个我有点记不得了，计算“再生率”是用

（高渗菌落数-低渗菌落数）/显微计数原生质体数

吧？这样还是可以计算的啊。
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天马0825
9楼2013-04-13 19:59:17
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天马0825

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by lcat at 2013-04-13 19:59:17
不客气 呵呵。这个我有点记不得了，计算“再生率”是用

（高渗菌落数-低渗菌落数）/显微计数原生质体数

吧？这样还是可以计算的啊。...

是的，那低渗是零。就直接高渗的/显微镜原生质体数么？而且我稀释到10的二次方个，高渗上也才长一二十个菌落，感觉太少了啊！
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10楼2013-04-13 23:21:17
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