24小时热门版块排行榜    

查看: 1616  |  回复: 8
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看

舒克8265

金虫 (著名写手)

[求助] 请教细菌细胞融合技术

请问有童鞋做过枯草芽孢杆菌和其他细菌菌体融合的研究吗?要做的话,一般研究所需要什么样的实验条件?先谢谢啦。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

松松一号

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
rainwander: 金币+5, MicEPI+1, 鼓励交流 2012-07-18 17:52:44
舒克8265: 金币+20, ★★★很有帮助 2012-07-18 20:55:28
这个是要做菌体去壁之后的原生质体融合是吧,我之前刚做过真菌的原生质体融合,这里可以给你说一些,你参考一下:
1. 无菌操作,需要在超净台中进行,所用的镊子、离心管什么的需要灭菌;
2.原生质体尽量减少保存时间,一般最多在4℃冰箱放1天;
3.需要比较好的显微镜,因为原生质体比较小,要么染色观察,如果不好染色就一般需要相差显微镜观察;
4.需要离心机,对于参考文献上的转速要考证对待,需要摸索一下最佳的转速;
5.需要血球计数板进行计数;
6.对于融合的方法需要探究。
7.去壁条件一般用酶解法,可以选择融壁酶等。
8.再生培养基一定要营养丰富。。

希望对你有所帮助哈。。
try try ! Day Day comfortable……
3楼2012-07-18 17:06:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

安静听

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
舒克8265: 金币+10 2012-07-18 20:55:35
w我在做,不过还在摸索去壁条件,实验条件挺简单的:显微镜、超净台、离心机。反正我在用的主要也就这么几样吧
2楼2012-07-18 15:40:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

舒克8265

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 松松一号 at 2012-07-18 17:06:04
这个是要做菌体去壁之后的原生质体融合是吧,我之前刚做过真菌的原生质体融合,这里可以给你说一些,你参考一下:
1. 无菌操作,需要在超净台中进行,所用的镊子、离心管什么的需要灭菌;
2.原生质体尽量减少保存 ...

可否不用显微镜观察?
4楼2012-07-18 21:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

舒克8265

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 松松一号 at 2012-07-18 17:06:04
这个是要做菌体去壁之后的原生质体融合是吧,我之前刚做过真菌的原生质体融合,这里可以给你说一些,你参考一下:
1. 无菌操作,需要在超净台中进行,所用的镊子、离心管什么的需要灭菌;
2.原生质体尽量减少保存 ...

另外,可否将具体步骤发给我?谢谢
5楼2012-07-18 21:17:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松松一号

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 舒克8265 at 2012-07-18 21:17:16
可否不用显微镜观察?...

应该不能吧,不然不好观察去壁的情况,如果不观察倒也是可以直接做,但是参考文献的条件毕竟还是要考究的嘛,实验条件也有一些差异的。还有需要显微镜观察计数的呢。

具体的你多查找几篇参考文献,先按它的步骤进行预实验,然后优化操作就行了。加油啦。
try try ! Day Day comfortable……
6楼2012-07-18 21:30:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

舒克8265

金虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 松松一号 at 2012-07-18 21:30:15
应该不能吧,不然不好观察去壁的情况,如果不观察倒也是可以直接做,但是参考文献的条件毕竟还是要考究的嘛,实验条件也有一些差异的。还有需要显微镜观察计数的呢。

具体的你多查找几篇参考文献,先按它的步骤 ...

哎。我在纯粹的德国分析化学实验室,一大堆LC, GC, MS,各种光谱,就是灭有超净台和显微镜。。。。。
7楼2012-07-19 05:25:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松松一号

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 舒克8265 at 2012-07-19 05:25:20
哎。我在纯粹的德国分析化学实验室,一大堆LC, GC, MS,各种光谱,就是灭有超净台和显微镜。。。。。...

呃,在这个实验室为什么会要你做融合实验的。。?
try try ! Day Day comfortable……
8楼2012-07-19 12:56:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sicecream

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
实验设备很简单,一般简单的超净台、离心机、水浴锅、显微镜就可以了
至于再生培养基的话,可以试试直接加0.6M氯化钠或0.5M蔗糖,要是长的不好也可以优化下再生培养基,营养丰富点就好,再就是酶种类、酶浓度、酶解时间的选择,灭活方式以及灭活条件的选择,融合方法的选择,融合条件的选择等,还有在去壁后离心转速切记不要太高
9楼2012-07-20 13:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 舒克8265 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 346求调剂[0856] +3 WayneLim327 2026-03-16 6/300 2026-03-19 11:21 by WayneLim327
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +10 Liwangman 2026-03-15 10/500 2026-03-19 10:25 by 无际的草原
[考研] 本科郑州大学物理学院,一志愿华科070200学硕,346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 304求调剂 +6 司空. 2026-03-18 6/300 2026-03-18 23:03 by 星空星月
[考研] 330求调剂 +3 小材化本科 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:55 by 无懈可击111
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 5/250 2026-03-18 11:13 by QGZDSYS
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 一志愿,福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见