应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 请教细菌细胞融合技术
91/1返回列表
查看: 1971  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看

舒克8265

金虫 (著名写手)

[求助] 请教细菌细胞融合技术

请问有童鞋做过枯草芽孢杆菌和其他细菌菌体融合的研究吗？要做的话，一般研究所需要什么样的实验条件？先谢谢啦。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-07-18 06:16:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

安静听

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
舒克8265: 金币+10 2012-07-18 20:55:35
w我在做，不过还在摸索去壁条件，实验条件挺简单的：显微镜、超净台、离心机。反正我在用的主要也就这么几样吧
赞一下 回复此楼
2楼2012-07-18 15:40:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松松一号

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+5, MicEPI+1, 鼓励交流 2012-07-18 17:52:44
舒克8265: 金币+20, ★★★很有帮助 2012-07-18 20:55:28
这个是要做菌体去壁之后的原生质体融合是吧，我之前刚做过真菌的原生质体融合，这里可以给你说一些，你参考一下：
1. 无菌操作，需要在超净台中进行，所用的镊子、离心管什么的需要灭菌；
2.原生质体尽量减少保存时间，一般最多在4℃冰箱放1天；
3.需要比较好的显微镜，因为原生质体比较小，要么染色观察，如果不好染色就一般需要相差显微镜观察；
4.需要离心机，对于参考文献上的转速要考证对待，需要摸索一下最佳的转速；
5.需要血球计数板进行计数；
6.对于融合的方法需要探究。
7.去壁条件一般用酶解法，可以选择融壁酶等。
8.再生培养基一定要营养丰富。。

希望对你有所帮助哈。。
赞一下(1人) 回复此楼
try try ! Day Day comfortable……
3楼2012-07-18 17:06:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

舒克8265

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 松松一号 at 2012-07-18 17:06:04
这个是要做菌体去壁之后的原生质体融合是吧，我之前刚做过真菌的原生质体融合，这里可以给你说一些，你参考一下：
1. 无菌操作，需要在超净台中进行，所用的镊子、离心管什么的需要灭菌；
2.原生质体尽量减少保存 ...

可否不用显微镜观察？
赞一下 回复此楼
4楼2012-07-18 21:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

舒克8265

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 松松一号 at 2012-07-18 17:06:04
这个是要做菌体去壁之后的原生质体融合是吧，我之前刚做过真菌的原生质体融合，这里可以给你说一些，你参考一下：
1. 无菌操作，需要在超净台中进行，所用的镊子、离心管什么的需要灭菌；
2.原生质体尽量减少保存 ...

另外，可否将具体步骤发给我？谢谢
赞一下 回复此楼
5楼2012-07-18 21:17:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松松一号

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 舒克8265 at 2012-07-18 21:17:16
可否不用显微镜观察？...

应该不能吧，不然不好观察去壁的情况，如果不观察倒也是可以直接做，但是参考文献的条件毕竟还是要考究的嘛，实验条件也有一些差异的。还有需要显微镜观察计数的呢。

具体的你多查找几篇参考文献，先按它的步骤进行预实验，然后优化操作就行了。加油啦。
赞一下 回复此楼
try try ! Day Day comfortable……
6楼2012-07-18 21:30:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

舒克8265

金虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 松松一号 at 2012-07-18 21:30:15
应该不能吧，不然不好观察去壁的情况，如果不观察倒也是可以直接做，但是参考文献的条件毕竟还是要考究的嘛，实验条件也有一些差异的。还有需要显微镜观察计数的呢。

具体的你多查找几篇参考文献，先按它的步骤 ...

哎。我在纯粹的德国分析化学实验室，一大堆LC, GC, MS，各种光谱，就是灭有超净台和显微镜。。。。。
赞一下 回复此楼
7楼2012-07-19 05:25:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松松一号

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 舒克8265 at 2012-07-19 05:25:20
哎。我在纯粹的德国分析化学实验室，一大堆LC, GC, MS，各种光谱，就是灭有超净台和显微镜。。。。。...

呃，在这个实验室为什么会要你做融合实验的。。？
赞一下 回复此楼
try try ! Day Day comfortable……
8楼2012-07-19 12:56:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sicecream

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
实验设备很简单，一般简单的超净台、离心机、水浴锅、显微镜就可以了
至于再生培养基的话，可以试试直接加0.6M氯化钠或0.5M蔗糖，要是长的不好也可以优化下再生培养基，营养丰富点就好，再就是酶种类、酶浓度、酶解时间的选择，灭活方式以及灭活条件的选择，融合方法的选择，融合条件的选择等，还有在去壁后离心转速切记不要太高
赞一下 回复此楼
9楼2012-07-20 13:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 舒克8265 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +8 majunge000 2026-08-10 9/450 2026-08-12 22:17 by 虫友是什么虫
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 长年满屏的广告，版主太不责任了。基金也等的急 +4 gltch 2026-08-12 4/200 2026-08-12 16:08 by eulota
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭