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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请大家帮我看看我的电泳条带怎么了？
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)

[求助] 请大家帮我看看我的电泳条带怎么了？

跑的是质粒DNA（不到3000 bp），可时好时坏。超螺旋跑出来总是不成形。大家帮我分析下是怎么回事。

2013-4-1-9(80v80min).jpg



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1楼 2013-04-08 20:11:30
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

下雨的傍晚

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xuehu2008: 金币+2, ★有帮助 2013-04-10 18:19:47
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-23 22:18:10
感觉是点样浓度大了，你减少点样体积试一下.
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haha
4楼2013-04-09 08:45:06
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xuehu2008: 金币+2 2013-04-09 08:26:18
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-23 22:18:16
感觉是样品的盐浓度高。质粒是手提的还是盒子提的？
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2楼2013-04-09 04:32:55
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-09 04:32:55
感觉是样品的盐浓度高。质粒是手提的还是盒子提的？

质粒是直接买来的，溶解在常规TE中，且用水稀释了好几倍。
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3楼2013-04-09 08:27:20
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
xuehu2008: 金币+2, ★有帮助 2013-04-10 18:20:03
引用回帖:
3楼: Originally posted by xuehu2008 at 2013-04-09 08:27:20
质粒是直接买来的，溶解在常规TE中，且用水稀释了好几倍。...

你的上样量是多少？是否确定样品全部溶解了？
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5楼2013-04-09 11:26:49
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ilovejim

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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xuehu2008: 金币+2 2013-04-10 18:21:05
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-23 22:18:30
上样量有点大，一般一毫升菌液，提取质粒，溶解到60 ul 水或者TE中，上样2-3 ul电泳即可。
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爱生活，然后---爱科学
6楼2013-04-09 17:05:32
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乐乐3952

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xuehu2008: 金币+2, ★有帮助 2013-04-10 18:21:25
引用回帖:
4楼: Originally posted by 下雨的傍晚 at 2013-04-09 08:45:06
感觉是点样浓度大了，你减少点样体积试一下.

应该是样品上样量大了造成的拖尾严重
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一花一世界、一叶一菩提
7楼2013-04-09 17:21:38
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-09 11:26:49
你的上样量是多少？是否确定样品全部溶解了？...

上样量500 ng，算不算大？
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8楼2013-04-10 18:20:47
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)
额，大家都觉得上样量大，其实一孔就500 ng，100 ng/uL，上5微升，算大吗？
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9楼2013-04-10 18:22:02
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xuehu2008 at 2013-04-10 18:20:47
上样量500 ng，算不算大？...

上样量太大，一般100ng就足够了。
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10楼2013-04-11 02:07:13
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