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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » real-time PCR引物设计问题
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fanwq258

木虫 (正式写手)

[求助] real-time PCR引物设计问题

做real-time mRNA有几千bp，而扩增只需要一两百，那么引物应该在那部分设计呢？
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要么好好活，要么死，拒绝半死不活
1楼 2013-04-02 09:37:49
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+2, 鼓励应助，分子生物版块，期待你的精彩。 2013-04-03 08:36:06
如果没有特殊要求的话，设计在mRNA序列上就可以了。
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2楼2013-04-02 15:58:26
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ytxy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香。生物版块欢迎你的无私奉献。 2013-04-03 08:36:26
fanwq258: 金币+5 2013-06-10 18:17:45
如果用olig dT反转录，一般靠近3'端。上下游引物之间跨内含子，和DNA模板区别。如果mRNA有许多同源序列，要在差异的碱基上设计。
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3楼2013-04-02 17:43:12
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fanwq258

木虫 (正式写手)
4楼2013-04-02 23:14:20
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黄越

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ytxy at 2013-04-02 17:43:12
如果用olig dT反转录，一般靠近3'端。上下游引物之间跨内含子，和DNA模板区别。如果mRNA有许多同源序列，要在差异的碱基上设计。

请问具体要怎么设计呢，能否举个例子呢，谢谢哦。。期待回复
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5楼2013-07-09 21:56:49
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