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1338070201

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 1359365
注册: 2011-08-02
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 真核转染表达，求助

各位大神，我将我的蛋白克隆到一个带有puro抗性的真核质粒上，想筛选稳转。但是可能是我蛋白带有核酸内切酶活性的缘故，瞬时转染在293T细胞中都不表达。我想问问有什么解决方法，换质粒行吗？有哪些质粒可供选择？

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一切成功来源于脚踏实地

1楼2013-04-01 11:18:20

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here0009

银虫 (著名写手)

应助: 7 (幼儿园)
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专业: 生物化学

【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
1338070201: 金币+25, ★★★很有帮助 2013-04-02 15:37:26
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 18:08:49

你把内切酶活性的关键位点突变掉看下是否可以表达，如果可以，则说明是内切酶活性而非载体的原因。可能再换载体也没什么用了。不过你最好还是一些参考内切酶表达的文献看看吧，