| 查看: 2568 | 回复: 25 | ||
宝贝猪301木虫 (正式写手)
|
[求助]
急！！！黄酮苷过LH-20凝胶柱的相关问题！
|
|
|
小弟需要分离纯化几种黄酮苷，这几种黄酮苷挂有一个或两个糖。 现有几点疑问： 1、纯甲醇和50%甲醇谁的洗脱能力强？ 2、选用什么洗脱剂最合适？ 3、之前用过50%甲醇洗脱，整个柱子都变黄了，仅仅洗脱下来部分物质。今天尝试了纯甲醇洗脱，柱头3cm为白色，其余部分也是全部变黄，同样仅仅洗脱下来部分物质。两次均是大部分物质挂在柱子上洗不下来！有什么好的办法么？！ 4、有没有其它可以分离这种大极性黄酮苷的办法？！（PS：条件有限，没办法用制备）  望各位大神给予指导！  [ 来自科研家族 Natural Products家族 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
293调剂
已经有7人回复
-
288求调剂，一志愿华南理工大学071005
已经有5人回复
-
327求调剂
已经有8人回复
-
307求调剂
已经有14人回复
-
283分求调剂
已经有14人回复
-
一志愿211，0703化学305分求调剂
已经有16人回复
-
环境专硕调剂
已经有13人回复
-
338求调剂
已经有8人回复
-
求材料调剂，一志愿郑州大学289分
已经有17人回复
-
一志愿华南师范大学0702物理学305调剂
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- LH-20葡聚糖凝胶柱的清洗
已经有11人回复
- 国产替代反相相关分离问题
已经有10人回复
- 分子量相同，取代基位置不同的黄酮醇苷如何分离？
已经有12人回复
- 黄酮苷的分离 求助！！
已经有7人回复
- LH-20凝胶柱上样的问题
已经有14人回复
- Sephadex LH20凝胶柱稍有流干，柱头带入气泡，柱子还能用吗？急！
已经有8人回复
- 大豆苷元等黄酮类物质形成晶体？
已经有8人回复
- 【求助】银杏总黄酮醇苷的计算
已经有4人回复
- 【求助】sephadxe-LH-20葡聚糖凝胶上柱分离时可以加压吗
已经有19人回复
- 【求助】分单体的问题
已经有17人回复
- 【求助】LH-20葡聚糖凝胶该如何装柱子
已经有23人回复
tonypengt
木虫 (正式写手)
荒唐书生
- PhEPI: 1
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 2084.7
- 散金: 50
- 红花: 5
- 帖子: 607
- 在线: 187.7小时
- 虫号: 860004
- 注册: 2009-09-29
- 性别: GG
- 专业: 天然有机化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
宝贝猪301: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-05-09 12:17:37
宝贝猪301: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-05-09 12:17:37
|
SephadexLH20是非常适合分离天然产物的一类凝胶产品，它在不同溶剂中有不同的溶胀系数。 能分离100-4000Da的化合物！ 请问楼主你用的是多大的柱子装SephadexLH20？ 我们实验室甲醇系统凝胶柱是装在长2米，直径3.5厘米的玻璃柱中。 我用该柱分离过数量众多的黄酮及黄酮苷类化合物，效果非常不错！ 我估计楼主有两方面的原因！一个是柱床不稳定，也就是柱子没装好填料，凝胶柱不能像硅胶柱那样随便。 切记不能有气泡和断层。填料充分的溶剂系统泡胀后，以匀浆装入玻璃柱中，待凝胶不再自然沉降时加入大量 溶剂系统进行冲洗！使柱床压实，最后上样！ 还有就是流速的问题，依照我的使用经验，分离黄酮及糖苷类化合物流速在10-15秒/滴，下午三四点种开始上样，第二天早上或者中午就可以拿到馏分！有没有分开在晚上就可以看见是否有多个黄色的色带。 |
21楼2013-05-09 09:57:30
lijinyu2011
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 7105.4
- 散金: 2
- 红花: 2
- 帖子: 355
- 在线: 568.2小时
- 虫号: 1071683
- 注册: 2010-08-09
- 性别: MM
- 专业: 天然药物化学
6楼2013-04-01 15:29:28
huaqiangliu
新虫 (小有名气)
- 应助: 66 (初中生)
- 金币: 1124.3
- 红花: 3
- 帖子: 144
- 在线: 84.9小时
- 虫号: 2289755
- 注册: 2013-02-20
- 专业: 化学生物学与生物有机化学
14楼2013-04-03 10:19:53
宝贝猪301
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2774.3
- 散金: 50
- 帖子: 358
- 在线: 295.6小时
- 虫号: 988512
- 注册: 2010-04-03
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
18楼2013-04-20 19:35:48
宝贝猪301
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2774.3
- 散金: 50
- 帖子: 358
- 在线: 295.6小时
- 虫号: 988512
- 注册: 2010-04-03
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
19楼2013-04-20 19:39:24
yunnanyan
至尊木虫 (文坛精英)
- 应助: 43 (小学生)
- 金币: 25032.4
- 红花: 18
- 帖子: 13672
- 在线: 1177小时
- 虫号: 324279
- 注册: 2007-03-15
- 性别: MM
- 专业: 有机合成
2楼2013-03-31 20:32:16
wm0629
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 341 (大学生)
- 金币: 6381.8
- 红花: 3
- 帖子: 1962
- 在线: 77.9小时
- 虫号: 2217415
- 注册: 2013-01-01
- 性别: GG
- 专业: 中药炮制
3楼2013-04-01 07:56:45
宝贝猪301
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2774.3
- 散金: 50
- 帖子: 358
- 在线: 295.6小时
- 虫号: 988512
- 注册: 2010-04-03
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2013-04-01 10:34:31
5楼2013-04-01 11:21:00
wm0629
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 341 (大学生)
- 金币: 6381.8
- 红花: 3
- 帖子: 1962
- 在线: 77.9小时
- 虫号: 2217415
- 注册: 2013-01-01
- 性别: GG
- 专业: 中药炮制
7楼2013-04-01 17:00:15
分离高手
新虫 (小有名气)
- 应助: 81 (初中生)
- 金币: 1405.7
- 红花: 6
- 帖子: 187
- 在线: 111.5小时
- 虫号: 2323813
- 注册: 2013-03-06
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
宝贝猪301: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-04-01 20:28:20
xiaoxiao270: 金币+1 2013-04-20 20:04:37
感谢参与，应助指数 +1
宝贝猪301: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-04-01 20:28:20
xiaoxiao270: 金币+1 2013-04-20 20:04:37
| LH-20分离物质主要就是靠分子塞，兼有反向的作用，大家在看很多文献中都会用到。但是分离效果如何其实有得的大部分还要加上制备，才能将物质分开来。比较容易污染，甲醇的洗脱能力肯定比甲醇水的洗脱能力强，如果实在洗不好就用异丙醇加碱洗一下，不过得快洗出来。不行洗不出来只能用作粗分离，要么扔了再买新的。也不是很贵25g就300块左右，不过我觉得4楼说的靠谱。可以用聚酰胺试试。其实分离黄酮苷还有其他很多方法，反向层析树脂，反向硅胶，我们做牛蒡子甘元准备一类新药就是用的反向层析树脂SKP-10-8300分的，纯度能到99%。并不是碱水的洗脱能力强，是因为碱把吸附的物质分解掉或者反应成盐了吧。你的样品最好经过粗处理大孔树脂 聚酰胺 氧化铝什么的，再上精细分离的填料，别浪费钱哦 |
8楼2013-04-01 20:18:27
快乐虫
金虫 (小有名气)
将军
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 1470.9
- 散金: 7
- 帖子: 200
- 在线: 195.2小时
- 虫号: 893362
- 注册: 2009-11-04
- 性别: GG
- 专业: 中药质量评价
9楼2013-04-02 08:37:27
宝贝猪301
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2774.3
- 散金: 50
- 帖子: 358
- 在线: 295.6小时
- 虫号: 988512
- 注册: 2010-04-03
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
10楼2013-04-02 14:40:14
100