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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 急！！！黄酮苷过LH-20凝胶柱的相关问题！
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tonypengt

木虫 (正式写手)

荒唐书生

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
宝贝猪301: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-05-09 12:17:37
SephadexLH20是非常适合分离天然产物的一类凝胶产品，它在不同溶剂中有不同的溶胀系数。
能分离100-4000Da的化合物！
请问楼主你用的是多大的柱子装SephadexLH20？
我们实验室甲醇系统凝胶柱是装在长2米，直径3.5厘米的玻璃柱中。
我用该柱分离过数量众多的黄酮及黄酮苷类化合物，效果非常不错！
我估计楼主有两方面的原因！一个是柱床不稳定，也就是柱子没装好填料，凝胶柱不能像硅胶柱那样随便。
切记不能有气泡和断层。填料充分的溶剂系统泡胀后，以匀浆装入玻璃柱中，待凝胶不再自然沉降时加入大量
溶剂系统进行冲洗！使柱床压实，最后上样！
还有就是流速的问题，依照我的使用经验，分离黄酮及糖苷类化合物流速在10-15秒/滴，下午三四点种开始上样，第二天早上或者中午就可以拿到馏分！有没有分开在晚上就可以看见是否有多个黄色的色带。
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荒唐
21楼2013-05-09 09:57:30
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tonypengt

木虫 (正式写手)

荒唐书生
敬告楼主！切记不可将sephadexLH20装于短小的柱子中！这样分离效果很差！
是哪个楼说25克300呀？
卖点给我！
我刚买了GE的1000克花了25000啊！
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荒唐
22楼2013-05-09 10:02:19
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1power1

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

木有C18？自己装根也很容易的。
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23楼2013-05-09 10:11:41
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hinge1001

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是不是死吸附与洗脱时间长短没关系，主要与欲分离物质与填料基体的相互作用有关系。黄酮苷的糖链部分与LH-20基体会有很强的吸附作用，一般情况下这是无法避免的，可以试着在流动相中添加盐类，减弱这种吸附作用，或者如果改变流动相无法解决，只能换填料，可以换成硅胶基的反相填料试试。
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24楼2013-06-17 11:35:58
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xiaotingting

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 宝贝猪301 at 2013-04-01 10:34:31
请问你们上的柱子是凝胶柱，还是普通的硅胶柱？

我上样后仅饱和了十几分钟，会不会有影响？

流速会对分离效果有影响吗？是不是说柱子越高、流速越慢，分离效果就越好？

纯甲醇洗脱后，柱子变黄；1%NaOH冲 ...

洗脱能力还是甲醇强吧，只是1%的NaOH中因为有碱，与吸附的成分 反应使其脱附吧
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25楼2013-08-09 10:27:51
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lvmengchao09

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by huayu0428 at 2013-04-01 11:21:00
可以尝试用聚酰胺分离，效果很好，我用过

大神，能不能说的详细一点，比如流速，流动相方面
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26楼2017-04-08 12:27:38
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