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宝贝猪301

木虫 (正式写手)

[求助] 急!!!黄酮苷过LH-20凝胶柱的相关问题!

小弟需要分离纯化几种黄酮苷,这几种黄酮苷挂有一个或两个糖。

现有几点疑问:

1、纯甲醇和50%甲醇谁的洗脱能力强?

2、选用什么洗脱剂最合适?

3、之前用过50%甲醇洗脱,整个柱子都变黄了,仅仅洗脱下来部分物质。今天尝试了纯甲醇洗脱,柱头3cm为白色,其余部分也是全部变黄,同样仅仅洗脱下来部分物质。两次均是大部分物质挂在柱子上洗不下来!有什么好的办法么?!

4、有没有其它可以分离这种大极性黄酮苷的办法?!(PS:条件有限,没办法用制备)

望各位大神给予指导!

[ 来自科研家族 Natural Products家族 ]
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我...明明努力了!
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lijinyu2011

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
宝贝猪301: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-04-01 19:47:29
xiaoxiao270: 金币+1 2013-04-20 20:04:25
分离黄酮苷的过Sephadex LH-20,可以用纯甲醇过柱,不能过的时间太长,甲醇最后冲不下来,用70%左右丙酮水,快速冲下来,最后死吸附了,只能用酸碱再生柱子。另外还可以用氯仿:甲醇 1:1的系统。以上建议,仅供参考。
走在前面
6楼2013-04-01 15:29:28
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查看全部 26 个回答

yunnanyan

至尊木虫 (文坛精英)

没做过,友情帮顶贴
2楼2013-03-31 20:32:16
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wm0629

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢 2013-04-01 09:50:25
宝贝猪301: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-04-01 10:34:57
实验室一般都用纯甲醇作为流动相,上完样后在柱子上饱和4-6小时,然后用纯甲醇洗脱,把流速开到最大,柱子上的东西最好一天走完,这样柱子就不会有吸附。一般走完柱子后柱头会有变色的现象,不过没关系,你可以把那部分扣出去,继续上样。以上建议,仅供参考。
艰难困苦,玉汝于成。
3楼2013-04-01 07:56:45
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宝贝猪301

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wm0629 at 2013-04-01 07:56:45
实验室一般都用纯甲醇作为流动相,上完样后在柱子上饱和4-6小时,然后用纯甲醇洗脱,把流速开到最大,柱子上的东西最好一天走完,这样柱子就不会有吸附。一般走完柱子后柱头会有变色的现象,不过没关系,你可以把那 ...

请问你们上的柱子是凝胶柱,还是普通的硅胶柱?

我上样后仅饱和了十几分钟,会不会有影响?

流速会对分离效果有影响吗?是不是说柱子越高、流速越慢,分离效果就越好?

纯甲醇洗脱后,柱子变黄;1%NaOH冲柱可以洗去吸附残留的物质。是否就说明相对LH-20柱来说,水的洗脱能力比纯甲醇强
我...明明努力了!
4楼2013-04-01 10:34:31
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