| 查看: 1817 | 回复: 12 | ||
[求助]
请教组氨酸标记切除问题
|
| 请教大家一个问题，我用pET28a载体做表达，获得的酶进行酶学性质分析，投稿后一个审稿人说要对表达的酶进行6His切除，因为之前做没有碰到这样的问题，pET28a表达的酶怎么切除呢？我看上面也没有特别的位点啊。请大家帮忙指点一下。 |
回复此楼» 猜你喜欢
没有任何消息-是不是就凉了
已经有5人回复
-
如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》
已经有5人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有19人回复
-
能否退出参与的面上项目解除限项
已经有21人回复
-
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有16人回复
-
今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果
已经有21人回复
-
估计是周四
已经有4人回复
-
我面上完蛋了
已经有9人回复
-
范进中举一文的中心思想
已经有7人回复
-
朋友圈看到的
已经有9人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 新人求教！如何让用6His标记目的蛋白？
已经有4人回复
- 为何纯化带HIS标签的蛋白
已经有5人回复
- his标签纯化的蛋白如何保存
已经有4人回复
- 请问表达载体pPIC9K里有几个XhoI的酶切位点？
已经有8人回复
- 关于PCR引物中加入酶切位点的设计方法和酶切问题！ 新手，求帮忙！！
已经有4人回复
- 如何在蛋白纯化后去除6组氨酸(6His)标签
已经有17人回复
- 【求助/交流】组氨酸标记的蛋白表达活性问题
已经有17人回复
- 【分享】蛋白质纯化个人总结2
已经有38人回复
wizardfan
至尊木虫 (著名写手)
- BioEPI: 18
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 1.818
- 金币: 24644.2
- 散金: 197
- 红花: 48
- 沙发: 2
- 帖子: 2254
- 在线: 400.7小时
- 虫号: 1879241
- 注册: 2012-07-05
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
2楼2013-03-19 08:26:49
3楼2013-03-19 09:03:20
tjuakasa
木虫 (著名写手)
神木王虫
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 1385.9
- 散金: 481
- 红花: 7
- 帖子: 1136
- 在线: 473.1小时
- 虫号: 1498411
- 注册: 2011-11-18
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
4楼2013-03-19 17:12:10
ynkuaile
木虫 (小有名气)
- BioEPI: 2
- 应助: 86 (初中生)
- 金币: 1757.7
- 红花: 4
- 帖子: 270
- 在线: 73.4小时
- 虫号: 982579
- 注册: 2010-03-26
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2013-03-20 11:25:05
imyting
至尊木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 66 (初中生)
- 金币: 10511.7
- 散金: 658
- 红花: 5
- 帖子: 807
- 在线: 168.7小时
- 虫号: 736362
- 注册: 2009-03-31
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2013-03-21 22:15:26
7楼2013-03-22 23:19:55
|
Mostly the experiments were done appropriately, but one thing that certainly degrades the quality of the data is that the authors did not employ the sample throughout the study in which the His-tags were cut off. This is also pointed out by reviewer 2. If the authors wished to indicate the true characteristics of the enzyme, they should have used His-tag-free enzymes. Everyone knows His-tagged samples are often used in many studies and the tag system is a useful tool. Taken this comments into consideration, the authors will revise the current manuscript following the directions by reviewers. I finally suggest major revisions to your manuscript. Therefore, I invite you to respond to the reviewer(s)' comments and revise your manuscript. 我想审稿人的意思是认为6His会影响酶的特性，虽然我们的重组酶活性还挺高的。 |
8楼2013-03-24 15:54:27
9楼2013-03-24 15:56:00
10楼2013-03-24 15:57:59
20