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暖暖暖

铁虫 (小有名气)

[交流] 设计原核表达引物时,要不要卡率移码的问题? 已有7人参与

我构建到PET32A,要考虑移码吗?
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Only the strong survive.
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terryzn007

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
要啊,最好用软件分析下,我用的是比较简洁但是笨拙一点的DNAstar
3楼2013-03-11 17:00:34
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
从rbs后面第一个ATG开始算起,跟你选用的酶切位点有关。
5楼2013-03-11 18:12:54
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xl0071334

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果你的上引是NcoI或者是HindIII的话就要考虑移码的问题了。
6楼2013-03-12 08:00:42
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by xl0071334 at 2013-03-12 08:00:42
如果你的上引是NcoI或者是HindIII的话就要考虑移码的问题了。

你好!我用pET32a构建表达载体,正在愁这个移码问题啊,因为很难找到合适的酶切位点做双酶切,我选了上游引物添加NcoI(CCATGG)和下游引物添加Not I(GCGGCCGC)酶切位点,结果是上游引入了CATGG粘性末端,我还不知道该如何去判断是否发生移码呢?请问有什么方法和软件比较方便分析移码突变问题吗?
思路决定出路。。。
8楼2013-05-22 10:24:27
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