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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 设计原核表达引物时，要不要卡率移码的问题？
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暖暖暖

铁虫 (小有名气)

[交流] 设计原核表达引物时，要不要卡率移码的问题？ 已有7人参与

我构建到PET32A，要考虑移码吗？
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Only the strong survive.
1楼 2013-03-10 16:49:46
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Csx2012

新虫 (正式写手)
跟酶切位点有关
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2楼2013-03-10 17:37:52
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terryzn007

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
要啊，最好用软件分析下，我用的是比较简洁但是笨拙一点的DNAstar
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3楼2013-03-11 17:00:34
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suohaicui

铁虫 (初入文坛)
肯定要啊！
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4楼2013-03-11 17:47:53
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
从rbs后面第一个ATG开始算起，跟你选用的酶切位点有关。
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5楼2013-03-11 18:12:54
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xl0071334

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果你的上引是NcoI或者是HindIII的话就要考虑移码的问题了。
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6楼2013-03-12 08:00:42
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jiaowenqiang

铜虫 (正式写手)
当然要考虑
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7楼2013-03-13 11:18:54
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
6楼: Originally posted by xl0071334 at 2013-03-12 08:00:42
如果你的上引是NcoI或者是HindIII的话就要考虑移码的问题了。

你好！我用pET32a构建表达载体，正在愁这个移码问题啊，因为很难找到合适的酶切位点做双酶切，我选了上游引物添加NcoI（CCATGG）和下游引物添加Not I（GCGGCCGC）酶切位点，结果是上游引入了CATGG粘性末端，我还不知道该如何去判断是否发生移码呢？请问有什么方法和软件比较方便分析移码突变问题吗？
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思路决定出路。。。
8楼2013-05-22 10:24:27
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xl0071334

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以用DNAMAN、DNAstar,不用软件业是可以分析的
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9楼2013-05-22 18:30:26
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