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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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暖暖暖

超级版主

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[交流] 设计原核表达引物时,要不要卡率移码的问题? 已有7人参与

我构建到PET32A,要考虑移码吗?
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Csx2012

专家顾问

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跟酶切位点有关
2楼2013-03-10 17:37:52
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terryzn007

超级版主

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要啊,最好用软件分析下,我用的是比较简洁但是笨拙一点的DNAstar
3楼2013-03-11 17:00:34
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suohaicui

管理员

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肯定要啊!
4楼2013-03-11 17:47:53
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gaojuan1985

主管区长

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从rbs后面第一个ATG开始算起,跟你选用的酶切位点有关。
5楼2013-03-11 18:12:54
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xl0071334

专家顾问

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如果你的上引是NcoI或者是HindIII的话就要考虑移码的问题了。
6楼2013-03-12 08:00:42
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jiaowenqiang

专家顾问

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当然要考虑
7楼2013-03-13 11:18:54
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lmcyjxs

版主

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引用回帖:
6楼: Originally posted by xl0071334 at 2013-03-12 08:00:42
如果你的上引是NcoI或者是HindIII的话就要考虑移码的问题了。

你好!我用pET32a构建表达载体,正在愁这个移码问题啊,因为很难找到合适的酶切位点做双酶切,我选了上游引物添加NcoI(CCATGG)和下游引物添加Not I(GCGGCCGC)酶切位点,结果是上游引入了CATGG粘性末端,我还不知道该如何去判断是否发生移码呢?请问有什么方法和软件比较方便分析移码突变问题吗?
思路决定出路。。。
8楼2013-05-22 10:24:27
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xl0071334

主管区长

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可以用DNAMAN、DNAstar,不用软件业是可以分析的
9楼2013-05-22 18:30:26
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