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湖畔狂想

金虫 (小有名气)

[交流] 怎么才能知道提的蛋白好不好? 已有3人参与

小弟最近在研究如何提植物的蛋白,以后会做2-D。
现在有个问题想向前辈们请教。
就是,在我做2-D之前,我如何才能知道自己提的蛋白好不好?
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lys198886

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wizardfan: 金币+2, 肺腑之言啊 2013-03-09 07:05:18
提的好不好要从好几个方面说明:首先最重要的是你提的蛋白的纯度要高,怎样才能知道你提的纯度的高低,得通过定量你才能知道。其次是你的蛋白里面杂质要尽可能的少,这个的等你的胶跑完后你才能知道。所以这个得在你做实验的过程中慢慢的摸索,别人给你说的都不如你自己亲自做一下实在,祝你实验顺利!
4楼2013-03-08 22:58:43
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查看全部 8 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不清楚你说的好不好是什么意思。你用的什么裂解缓冲液体系提的样品?做2D水化的时候蛋白样品是变性的,所以有人制备2D样品直接用含有尿素、硫脲、CHAPS的裂解液提。不过,也可以用普通缓冲液提。最重要的是样品中绝对不能有SDS这类离子去垢剂。如果缓冲液中含盐量高,最好除盐再上2D。
2楼2013-03-08 15:46:42
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湖畔狂想

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lys198886 at 2013-03-08 22:58:43
提的好不好要从好几个方面说明:首先最重要的是你提的蛋白的纯度要高,怎样才能知道你提的纯度的高低,得通过定量你才能知道。其次是你的蛋白里面杂质要尽可能的少,这个的等你的胶跑完后你才能知道。所以这个得在你 ...

谢谢!
5楼2013-03-09 14:33:03
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湖畔狂想

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-08 15:46:42
不清楚你说的好不好是什么意思。你用的什么裂解缓冲液体系提的样品?做2D水化的时候蛋白样品是变性的,所以有人制备2D样品直接用含有尿素、硫脲、CHAPS的裂解液提。不过,也可以用普通缓冲液提。最重要的是样品中绝 ...

我的意思是提出的蛋白种类是否丰富。
6楼2013-03-09 14:36:53
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