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麦子绿豆

银虫 (小有名气)

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专业: 微生物生理与生物化学

[求助] Native-PAGE

求助：
小弟最近在做Native-PAGE，12%的分离胶、6%的浓缩胶，Tris-甘氨酸电泳buffer，与SDS-PAGE的区别就是这三种都没有加SDS，其他成分一样。110V冰浴电泳，电流基本在10-20mA。电泳完成后切割部分条带进行考染。

出现问题是：我的蛋白都堆积在点样位置，并没有进行迁移。请高手解答，在线等，谢谢！

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1楼 2013-03-05 15:19:56

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Phyrce

铜虫 (小有名气)

应助: 12 (小学生)
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【答案】应助回帖

引用回帖:

8楼: Originally posted by 麦子绿豆 at 2013-03-05 19:44:28
恩，我也认为等电点对native-Page的影响比较大，但是我不知道这个蛋白的信息，没法确定他的等电点，难道还要先去测下等电点么。。。我一直按照酸性蛋白的操作电泳，明天尝试下碱性的。谢谢！...

如果你知道蛋白序列，即使是名称，也可以到数据库查啊