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阳光漫漫

铁虫 (初入文坛)

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[求助] 易错pcr 条件

我在做易错PCR进行基因突变，最后通过重组，将目的基因敲除。想请教一下，易错PCR的体系，尤其是Mg2+和Mn2+的浓度。若确定Mg2+和Mn2+的浓度，是否需要测定该Mg2+和Mn2+的浓度条件下的基因突变率？谢谢

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1楼 2013-03-04 14:27:24

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xtcao668

至尊木虫 (著名写手)

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专业: 微生物遗传育种学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

怎么不用试剂盒啊？有现成的kit。还以变化四种碱基中两种碱基的浓度。

生活的理想就是理想的生活

2楼2013-03-04 16:15:51

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无为书生

铁虫 (小有名气)

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专业: 生物大分子结构与功能

镁离子可以做个梯度，条件是能够P出来，有拖尾现象，还有Taq、dNTP等，都是需要摸索的，别人的条件不一定适合你的基因。祝实验顺利！

3楼2013-03-04 16:44:14

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