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从基因文库中筛选到目的基因后的分析
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各位虫友：本人前段时间从构建好的基因文库中通过功能筛选，筛选到了一株阳性克隆。接着对 测序结果在NCBI中比对，没有能和测出的结果比对上的。因此不知道这段序列编码的是什么酶。 接着把测出的序列用Vector NTI进行ORF分析，如果 将正向测序结果输入（以M13+向开始）显示整个序列被分成很多个ORF,并且最大ORF也只不过500bp，我想这应该不足以编码我的目标蛋白（酰胺酶，实验室克隆出的相同功能的酰胺酶700多bp）；如果将反向的测序结果输入（以M13-向开始）显示大致可以分俩个阅读框，一个1600bp左右，一个有700bp左右。 对于这样的结果我不知道该怎么分析，怎么设计引物克隆出目标编码基因？ |
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