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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 载体弄混了，对DNA的测序有影响吗
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970402570

新虫 (初入文坛)

[求助] 载体弄混了，对DNA的测序有影响吗

请问，我拿去菌液去公司测序，但是载体好像弄混了，是pMD®19-T Vector
和  pMD®18-T Vector ，都是TAKARA公司的，这对测序有影响吗
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1楼 2013-02-28 20:15:08
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果菌的抗生素抗性和测序引物相同，没有影响的。你叶完全可以及时联系公司，告诉他们正确的载体。
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2楼2013-02-28 22:03:55
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
两个载体的通用引物之一样的M13F/M13R，M(-47)/..用这些引物是没有问题的
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-03-01 01:20:16
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yesali

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
通知测序公司，他们会给你处理的，没什么影响
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4楼2013-03-01 08:42:57
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tianchunying

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-03-01 10:44:14
那要看你的测序引物是否一样，载体弄错了，若是用的通用引物，就得马上通知公司调换通用引物，如果是自己设计的针对目的片段的引物那就没问题了，但是你载体不对，对你后期的实验有没有影响啊，你可得弄明白了
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天行健，君子以自强不息；地势坤，君子以厚德载物。
5楼2013-03-01 10:01:33
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970402570

新虫 (初入文坛)
引物是我自己设计的，我测的序列是同一物种中同一个基因，只不过是用三对不同的引物扩增出来之后去测序了，如果我没有弄错载体，但是其中两个用的是pmd19t另一个是pmd18t，我是克隆基因用，这是提rna后第一次测序，是我基因的一小部分这对后来的实验有没有影响？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2013-03-01 11:19:49
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tianchunying

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
970402570: 金币+2 2013-03-04 11:03:54
你这两个载体我没用过，不了解，你是用大肠杆菌转化质粒扩增吗？如果是的话，只要这两个载体能在大肠杆菌中表达，还能被抗生素筛选就没有问题了，
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天行健，君子以自强不息；地势坤，君子以厚德载物。
7楼2013-03-01 12:04:16
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huangguoqing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
970402570: 金币+2 2013-03-04 11:04:07
没什么影响的。如果你用通用载体测序，两者的通用引物是一样的，如果你用外源基因的特异性引物测序，那跟载体没一点关系。
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8楼2013-03-03 10:58:29
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