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TwentyJiang

新虫 (初入文坛)

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专业: 环境微生物学

[求助] DGGE条带割胶回收PCR

我目前在做细菌的DGGE，目标片段大概500bp。DGGE跑出来条带清晰，准备割胶克隆测序。但是割胶回收做的PCR试了几次都不出现条带，想请教各位这一步有什么经验和小技巧在里面。我是直接用40μL水浸泡6h左右做的PCR。谢谢各位！

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1楼 2013-01-30 13:36:25

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siyingweilan

新虫 (初入文坛)

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专业: 环境微生物学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
TwentyJiang: 金币+10, ★有帮助 2013-04-25 09:25:56

我以前也遇到过这样的问题，当时一方面是优化了PCR体系，并换了taq酶和dntp等，再就是把模板做了一个梯度稀释，有时模板浓度太高，也会抑制PCR的效果。

花开花落云卷云舒

2楼2013-02-21 14:32:25

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