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TwentyJiang

新虫 (初入文坛)

[求助] DGGE条带割胶回收PCR

我目前在做细菌的DGGE,目标片段大概500bp。DGGE跑出来条带清晰,准备割胶克隆测序。但是割胶回收做的PCR试了几次都不出现条带,想请教各位这一步有什么经验和小技巧在里面。我是直接用40μL水浸泡6h左右做的PCR。谢谢各位!
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siyingweilan

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
TwentyJiang: 金币+10, 有帮助 2013-04-25 09:25:56
我以前也遇到过这样的问题,当时一方面是优化了PCR体系,并换了taq酶和dntp等,再就是把模板做了一个梯度稀释,有时模板浓度太高,也会抑制PCR的效果。
花开花落云卷云舒
2楼2013-02-21 14:32:25
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