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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 转基因检测怎么一直P不出来
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涂鸦Ｙ

金虫 (初入文坛)

[求助] 转基因检测怎么一直P不出来

我在做小麦的转基因检测，已经是T5代了，但是PCR检测一直P不出来，梯度、Touch down、Touch up 都用过了还是不行，换了两对引物也还是不行，请各位大虾支个招吧，万分感谢！！！
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1楼 2013-01-17 20:44:17
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涂鸦Ｙ

金虫 (初入文坛)
内容已删除
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3楼2013-01-19 17:08:37
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涂鸦Ｙ

金虫 (初入文坛)
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5楼: Originally posted by lanqingkuo at 2013-01-21 14:19:18
加对照，换筛选标记引物

您好，如何选择筛选标记引物
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6楼2013-01-21 17:55:17
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涂鸦Ｙ

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lanqingkuo at 2013-01-22 10:24:14
不知道你的转化体包括什么筛选标记基因，一般有35s、nos、bar、pat、npt2等基因，可以试一下，找找问题在哪里？

好的，我试下，非常感谢
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8楼2013-01-22 11:10:32
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涂鸦Ｙ

金虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by 11071120 at 2013-01-24 08:59:43
先筛选连的标记把，你筛的是苗吧，你要是确定你筛的一定是转基因苗的后代的话，筛不出来试试把DNA稍微稀释下，再试试，或者出现那种转基因片段突然缺失的现象，这就没有办法了，只能大量种，大量筛，一两百的量应该 ...

我的苗子是用基因枪转的，这一代有五百多株材料，我现在做了二百多株了，还没有检测到
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11楼2013-01-24 20:07:45
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涂鸦Ｙ

金虫 (初入文坛)
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10楼: Originally posted by magy2006 at 2013-01-24 13:18:13
我只能说你很悲剧。
如果前任把材料搞混了，野生型当成了转基因给你做，做死也不可能得到理想结果啊。

不会吧，那就很悲剧了。
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12楼2013-01-24 20:08:16
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涂鸦Ｙ

金虫 (初入文坛)
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13楼: Originally posted by wanhscn at 2013-01-25 16:03:56
p不出来就做southern

嗯，我试试
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15楼2013-02-20 09:49:19
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涂鸦Ｙ

金虫 (初入文坛)
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14楼: Originally posted by scird at 2013-02-18 17:31:12
转基因高代p检测不出来是很正常的。原因真的不详。既然已经是T5代了，株系已经高度相似了，可以考虑用southern了。

嗯，好的。谢谢
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16楼2013-02-20 09:49:40
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