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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 碱溶提取的蛋白质沉淀不下来呢
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琉月2012

铁虫 (初入文坛)

[求助] 碱溶提取的蛋白质沉淀不下来呢

采用超声辅助碱溶酸沉法提取蛋白质，为什么酸沉时就是沉淀得不多呢？？？？整个呈现混浊状态，就是离心后还是混浊的，沉淀下来的很少，请高手指点一下啊，就是调节pH在等电点附近，还是不行啊
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1楼2013-01-16 11:06:56
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chenkyn

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2013-03-23 10:14:02
分组做，慢慢调PH，自己摸索出最佳PH点。
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2楼2013-01-17 11:59:15
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294041918

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2013-04-02 16:52:12
试试用酶法除蛋白，蛋白酶酶解效果很好。
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3楼2013-02-25 09:25:35
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qww1234

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2013-04-02 16:52:17
做pH梯度，看看那个梯度下的自然沉淀最多，等电点时我记得很容易看到大片的絮状物
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4楼2013-03-23 01:06:58
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felzm66

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2013-04-02 16:52:24
首先，确定你的溶液中有蛋白质。而不是小肽类等物质，然后做梯度实验，看在哪个pH值下沉淀最多。
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5楼2013-03-23 17:53:07
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sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

树树8013: 应助指数+1, 谢谢阳光先生的应助 2013-03-27 21:26:34
这个很多可能性，一个就是你提取液中蛋白含量。可以先测定一下每ml提取中有多少蛋白，如果含量低，沉淀当然少。在就是你选择的pH是否是最适宜沉淀的pH。一般人都会跟你说等电点，但是提取液中是混合物，很多种蛋白，这时候谈等电点没什么意义。跟上面几楼说的一样，可以做一个梯度pH实验，找到最适宜pH。还有一些蛋白不适宜酸沉淀，你可以换硫酸铵或TCA沉淀
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6楼2013-03-26 22:37:23
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dandan_cece

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2013-04-02 16:52:33
先要测下你所提取的东西蛋白质含量吧，如果蛋白质含量本来就很低，那沉下来的肯定就少啊
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7楼2013-04-01 14:10:34
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傲娇

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

确定合适的等电点，有些蛋白是混合体，等电点不一，你多做几个对照试一下，其次，前面的碱溶可能是碱液浓度低，这样溶解的蛋白就比较少，酸沉自然沉淀少，还有一点，可以酸沉久一些。你试试看，不知道你做的是从哪里提取的蛋白
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8楼2013-04-13 23:23:34
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LYN03040

禁虫
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9楼2024-09-09 14:35:59
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LYN03040

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10楼2024-09-09 14:37:56
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