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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 微生物生长曲线的绘制
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lym8947

铁虫 (小有名气)

[求助] 微生物生长曲线的绘制

要给筛选的菌做一个生长曲线，只是知道是测定OD600，但在细节上仍然有些地方不明白：
1、是将斜面保藏的菌种直接接一环在种子培养基内，分不用时间测定，还是要将菌种先做成种子液，再怎么办呢？？？
2、测定OD值时，用的对照是什么？蒸馏水还是培养基？？？
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1楼 2013-01-14 09:45:12
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

55晴朗天天

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
培养的时候不就是菌液吗，在不同的时间取一定量测就行，或者直接培养多瓶，按时间取；

对照当然是用培养基啦~
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有梦就有希望！想就有可能！
2楼2013-01-14 10:59:52
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j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
其实都可以。只是活化后测要快点，整个培养过程少了复苏生长的那段时间

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
8楼2013-01-14 12:51:02
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meibao521

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lym8947: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-14 18:12:35
1、斜面保藏的菌株应该活化之后才可以测定OD，活化的方法可以采用平板活化或者取一环接入种子培养基活化。建议使用种子培养基活化，活化好之后取适宜接种量接入种子培养基进行培养测定。
2、对照使用蒸馏水或培养基都可，在写文章时一定要交代清楚。建议最好使用原始培养基作为对照。
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12楼2013-01-14 16:00:52
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
1.将细菌活化后，如将冻存的细菌转入液体培养基16-24h或平板培养基24h，

2.取一接种环浑浊的液体培养基菌液或取平板上单菌落，接入任何一种常用的非选择性液体培养基，如TSB或LB中，
同时将空白培养基（不接种菌液）与接种过的培养基同时培养；

3.在不同的时间点，同时取菌液和空白培养基在分光光度计上测量菌液浓度，用空白培养基作为对照，

4.用菌液吸光度减去空白培养基吸光度后，做曲线，一般不应少于6个时间点。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
14楼2013-01-15 00:38:15
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chengjg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
取同一瓶，无菌操作能准确一点。做出的数据好一点。空白用同时取样的培养物离心做空白。前提培养基没有沉淀啊
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3楼2013-01-14 11:13:58
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chengjg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-01-14 15:39:38
取同一瓶，无菌操作能准确一点。做出的数据好一点。空白用同时取样的培养物离心做空白。前提培养基没有沉淀啊
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6楼2013-01-14 12:22:25
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chengjg

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lym8947 at 2013-01-14 11:27:21
您好，我看了一些文献说是要把斜面保存的菌先在种子液中活化，然后取1%在牛肉膏蛋白胨培养基中分不同时间测OD，有些文献说是直接取一环菌接入种子液中，分不同时间测OD就可以了，请问一下应该是用哪种方法啊...

先活化，然后取1-2%接种 测OD。
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7楼2013-01-14 12:25:49
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普通回帖

lym8947

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 55晴朗天天 at 2013-01-14 10:59:52
培养的时候不就是菌液吗，在不同的时间取一定量测就行，或者直接培养多瓶，按时间取；

对照当然是用培养基啦~

我看了一些方法上说是先把菌活化，做成种子液，然后再接入一定的量在牛肉膏蛋白胨培养基里，然后再测吸光值。有些方法是说直接挑一环接入种子培养基，分时间测就好了，到底用哪个啊
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4楼2013-01-14 11:23:49
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lym8947

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chengjg at 2013-01-14 11:13:58
取同一瓶，无菌操作能准确一点。做出的数据好一点。空白用同时取样的培养物离心做空白。前提培养基没有沉淀啊

您好，我看了一些文献说是要把斜面保存的菌先在种子液中活化，然后取1%在牛肉膏蛋白胨培养基中分不同时间测OD，有些文献说是直接取一环菌接入种子液中，分不同时间测OD就可以了，请问一下应该是用哪种方法啊
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5楼2013-01-14 11:27:21
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lym8947

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by j2 at 2013-01-14 12:51:02
其实都可以。只是活化后测要快点，整个培养过程少了复苏生长的那段时间

谢谢你了，这下我知道了，再麻烦问一下哈，活化后如果再测的话是要继续转接入活化培养基还是牛肉膏蛋白胨啊，我的是细菌
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9楼2013-01-14 14:46:57
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lym8947

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by chengjg at 2013-01-14 12:25:49
先活化，然后取1-2%接种 测OD。...

那转接的时候是接入牛肉膏蛋白胨培养基还是继续在活化培养基中
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10楼2013-01-14 14:47:48
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