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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 微生物生长曲线的绘制
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chengjg

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by lym8947 at 2013-01-14 14:47:48
那转接的时候是接入牛肉膏蛋白胨培养基还是继续在活化培养基中...

为什么要做生长曲线呀？不就是要看菌株在你选取的培养条件下的生长情况吗？那当然是在目标培养基里测定了。哎 这都不懂 鄙视
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21楼2013-01-15 18:33:06
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
引用回帖:
20楼: Originally posted by lym8947 at 2013-01-15 17:27:15
你好，能再请教个问题吗，我看到比浊法中要将吸光度控制在0.1——0.6之间，如果大于这个范围的话就要用培养基适当进行稀释，请问一下，如果稀释的话是不是所有点的菌液都应该稀释相同倍数再测啊...

让所有菌液都落在这个浓度范围内。如果高于的话，还好说，稀释就是了。低于的话，就需要浓缩了。

但是用不着浓缩，比如你测了一个大概的浓度为1，那么按照0.8、0.6、0.4、0.2、0.1 这样稀释就可以。

但是用于实际测量时，不能超出0.1-1的范围，这样就不准了。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
22楼2013-01-16 00:27:17
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lym8947

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
21楼: Originally posted by chengjg at 2013-01-15 18:33:06
为什么要做生长曲线呀？不就是要看菌株在你选取的培养条件下的生长情况吗？那当然是在目标培养基里测定了。哎 这都不懂 鄙视...

额，没做过这个，真心有些疑问呢，呵呵，不过还是谢谢你哦
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23楼2013-01-16 11:06:52
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lym8947

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
22楼: Originally posted by mizhoulong at 2013-01-16 00:27:17
让所有菌液都落在这个浓度范围内。如果高于的话，还好说，稀释就是了。低于的话，就需要浓缩了。

但是用不着浓缩，比如你测了一个大概的浓度为1，那么按照0.8、0.6、0.4、0.2、0.1 这样稀释就可以。

但是用于 ...

“比如你测了一个大概的浓度为1，那么按照0.8、0.6、0.4、0.2、0.1 这样稀释就可以。”不好意思啊，这个我还是有些不太明白，您的意思是说不同时间取的样是不同的稀释倍数吗？？？
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24楼2013-01-16 11:08:14
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meibao521

金虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by lym8947 at 2013-01-14 18:13:23
那再问一下，活化后的种子液应该接入种子培养基中测定OD，还是应该在牛肉膏蛋白胨培养基中...

我是学发酵专业的。我们一般是接入种子培养基测定OD。水平有限，仅供参考哈。
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25楼2013-01-16 19:50:29
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
引用回帖:
24楼: Originally posted by lym8947 at 2013-01-16 11:08:14
“比如你测了一个大概的浓度为1，那么按照0.8、0.6、0.4、0.2、0.1 这样稀释就可以。”不好意思啊，这个我还是有些不太明白，您的意思是说不同时间取的样是不同的稀释倍数吗？？？...

“不同时间取的样是不同的稀释倍数吗？”

你觉得有这个可能吗？

在不同的时间取样，菌液的浓度肯定是不尽相同的，有的可能远远小于0.1，甚至0.01，有的可能大于1.

这个时候，要尽量取浓度落在0.1~1的时间点上，一般在6~24或48h内采样检测，如果浓度大于1，那么就稀释是他们落在0.1~1之间，不过这样的点不要多。总过不过六七个点，这样的点最好只有一两个，实际浓度还要在1附近。

这样做出浓度曲线来才好用。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
26楼2013-01-17 00:26:34
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wenxu6699

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by chengjg at 2013-01-14 12:25:49
先活化，然后取1-2%接种 测OD。...

接种比例规定是1-2%吗
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27楼2013-03-15 18:47:59
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chengjg

木虫 (正式写手)
引用回帖:
27楼: Originally posted by wenxu6699 at 2013-03-15 18:47:59
接种比例规定是1-2%吗...

实验室一般默认这样了，工业生产接种量在10%-20%左右。
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28楼2013-03-18 08:43:53
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hurstbain

新虫 (初入文坛)
1.肯定是要做成种子液了，而且用之前最好是测一下种子液的OD600.
2.最好是用你取样的那个发酵液的离心上清液，因为菌体生长的时候会利用培养基中的成分，这样会引起培养基组分的变化，所以单纯用培养基会有些许误差，建议用发酵液上清液。
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29楼2014-02-24 15:51:20
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