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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】微生物生长曲线
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清水塘

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】微生物生长曲线

大家好！我想做一个醋酸菌的生长曲线以及醋酸发酵试验，但现在不知道怎么做了，请大家帮助哦。偶是这样想的：

一 斜面菌种活化：
       挑取一环活化好的斜面菌种，接种于装有10mL种子培养基的大试管中， 30℃，180r/min振荡培养24h；

二 生长曲线测定：
     按照1%的接种量，将活化好的试管种子接种于装有100mL种子培养基的250mL的三角瓶中，共8瓶， 30℃，180r/min振荡培养，每小时取样测定三角瓶培养液的OD值，以培养时间为横坐标，菌悬液的OD值为纵坐标，绘制其生长曲线。

三 发酵培养：
       根据醋酸菌的生长曲线，取对数生长期的三角瓶培养液按照10%的接种量接入到发酵培养基。
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1楼 2011-03-05 20:43:15
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

chenyyy

无虫 (正式写手)
清水塘(金币+2): 2011-03-10 19:46:52
我以前的毕业论文是这样做的     生长曲线
（1）三角瓶培养到对数生长期作为种子液
（2）用250mL的三角瓶配培养基，每瓶装液量约30mL，估计得20来瓶。用种子液接种1mL/瓶，保证接种量一致。
（3）发酵培养，每隔8小时取样，每次取三瓶，分别检测菌体生物量（用蒸馏水干净后，烘干到恒重；OD值也可以测），还有其它你需要的指标，如目产物浓度、C源等等。一定要测到整个生长曲线，延滞期（适应期）、指数期、稳定期和衰亡期。
最后就是作图了，分析的指标越多，越好。
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8楼2011-03-10 15:27:21
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普通回帖

tdong06

木虫 (正式写手)
★
看天(金币+1): 鼓励回答 2011-03-07 16:30:38
清水塘(金币+2): 2011-03-07 19:29:18
引用回帖:
Originally posted by 清水塘 at 2011-03-05 20:43:15:
大家好！我想做一个醋酸菌的生长曲线以及醋酸发酵试验，但现在不知道怎么做了，请大家帮助哦。偶是这样想的：

一 斜面菌种活化：
       挑取一环活化好的斜面菌种，接种于装有10mL种子培养基的大试管中， 30 ...

生长曲线，我觉得最好是平行试验，不要在三角瓶中取样，那样比较容易污染，而且数据也不是最准确的。
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2楼2011-03-05 21:16:39
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wlsky24

新虫 (正式写手)
接种量会影响生长的。可以摸一下。还有好像不用每个小时测的
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3楼2011-03-07 13:26:48
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冰鱼儿

金虫 (正式写手)
清水塘(金币+2): 2011-03-07 19:29:28
引用回帖:
Originally posted by tdong06 at 2011-03-05 21:16:39:
生长曲线，我觉得最好是平行试验，不要在三角瓶中取样，那样比较容易污染，而且数据也不是最准确的。

能具体说下你的平行试验么？还有如果不在三角瓶中取样，那在哪里取样呢？
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4楼2011-03-07 15:02:13
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waiter

木虫 (著名写手)
清水塘(金币+2): 2011-03-07 19:29:49
把活化好的接种到一三角瓶中。 然后再把三角瓶中的接种好的发酵液分装到试管（空灭好的）中。（培养基量根据试管量，可以20~30根10ml试管，每管5ml左右） 在试管中培养，每两小时取两管测OD。用平均值来做曲线。
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5楼2011-03-07 16:56:57
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清水塘

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by tdong06 at 2011-03-05 21:16:39:
生长曲线，我觉得最好是平行试验，不要在三角瓶中取样，那样比较容易污染，而且数据也不是最准确的。

文献上写道，挑取一环斜面菌种，接种到三角瓶中，培养至对数后期，作为种子液接种到发酵培养基中。我觉得他们菌种只培养了一次，而我的设计却培养了两次。
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6楼2011-03-07 19:27:15
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tdong06

木虫 (正式写手)
清水塘(金币+2): 2011-03-08 12:45:04
引用回帖:
Originally posted by 清水塘 at 2011-03-07 19:27:15:
文献上写道，挑取一环斜面菌种，接种到三角瓶中，培养至对数后期，作为种子液接种到发酵培养基中。我觉得他们菌种只培养了一次，而我的设计却培养了两次。

文献写的不一定都合理的，这个要看你自己了，其实没有什么大不了的，也不用太纠结。
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7楼2011-03-08 10:17:06
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郝钊

金虫 (小有名气)
如果用三角瓶培养，取样次数多了就不能真实反应培养的过程。我之前做过一年的发酵，尽管我们用的菌株不同，但是我个人认为，你没有必要非把菌体生长状态卡在对数期的前期或者中期，只要在对数期就可以，不就是要个好点的种子吗？我想你做了那么久的培养，生长到什么状态是对数期，还用测定吗？培养到刚刚浑浊不就可以了？如果你非要一个好的数据，那就用一个大点的瓶培养，尽量少取样，以免影响后期生长。
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9楼2011-03-10 17:20:26
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
文献，国内的中文论文都不能算文献，最好找SCI论文，质量高一些。
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10楼2011-03-10 17:22:06
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
国内的都算文章，不一定有参考价值，虽然也有质量优的，但不知道哪篇好哪篇不好，也就抱着怀疑的态度了。文献才有参考价值。
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11楼2011-03-10 17:24:31
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清水塘

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by chenyyy at 2011-03-10 15:27:21:
我以前的毕业论文是这样做的     生长曲线
（1）三角瓶培养到对数生长期作为种子液
（2）用250mL的三角瓶配培养基，每瓶装液量约30mL，估计得20来瓶。用种子液接种1mL/瓶，保证接种量一致。
（3）发酵培养，每 ...

请问一下，你的种子培养基和发酵培养基是什么配方？我的种子和发酵培养基是葡萄糖2%，酵母膏1.5%，种子加3%乙醇，发酵加5%的乙醇。一般培养到多长时间才到对数期。
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12楼2011-03-10 19:49:29
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chenyyy

无虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 清水塘 at 2011-03-10 19:49:29:
请问一下，你的种子培养基和发酵培养基是什么配方？我的种子和发酵培养基是葡萄糖2%，酵母膏1.5%，种子加3%乙醇，发酵加5%的乙醇。一般培养到多长时间才到对数期。

各种菌株都不一样，没有借鉴作用

如果你不清楚的话，就多做些摇瓶，每4小时取一次样，辛苦一下，争取一次做成功
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13楼2011-03-10 22:33:53
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朱青青1988

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
451209楼: Originally posted by 郝钊 at 2011-03-10 17:20:26
如果用三角瓶培养，取样次数多了就不能真实反应培养的过程。我之前做过一年的发酵，尽管我们用的菌株不同，但是我个人认为，你没有必要非把菌体生长状态卡在对数期的前期或者中期，只要在对数期就可以，不就是要个好 ...

我想问一下，我有个菌株要做感受态，是阴性菌，但不知道什么是对数期，想测个生长曲线，我看了有些人说测到一定程度是需要稀释才比较准确，没有做过，请教一下
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14楼2012-10-30 15:37:59
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涵宝0619

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
接种量怎么计算？

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15楼2017-03-22 22:24:15
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鷰子

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
亲，你的醋酸菌生长曲线做的时候每隔多久取一次样

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16楼2017-12-22 11:19:38
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