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hyacinth326金虫 (正式写手)
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[求助]
构建载体中遇到问题，请大家多多指教
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| 我想构建一个载体用于自己的实验，这个载体的复制子和复制蛋白来源于pKD46质粒，而抗性基因，蔗糖致死筛选标记和多克隆位点来源于另外的质粒pEX18Tc，复制子那一段长度为1600多bp，抗性基因那一段5000多bp，可是现在我构建了三个多月了仍然没有构建成功，我用的是NcoI和XhoI这两个内切酶，求高手指点一下我哪个地方有问题吧，我个人感觉应该不是酶切连接转化的问题，但是又找不出原因来，我会将我两个载体选取的区域附在下面，请大家帮我看一下是否有问题。 |
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ccharlien
木虫 (正式写手)
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2楼2013-01-10 05:59:33
stardu
新虫 (初入文坛)
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- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传育种学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
你好！你的这个我不清楚，你上次回答过我提的替换pKD46上抗性的问题，我还是没有最终连接上。之后我又追问了几个问题你可能没看到，你能去我的那个帖子回答一下么？万分感谢你！下面是网址： " target="_blank">http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5361486![](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/emuch_bbs_images/smilies/hand.gif\") |
3楼2013-01-10 09:02:11
5
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