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chenzn0625

新虫 (初入文坛)

[求助] 发酵液多糖的分离纯化

1 用DEAE-纤维素分离纯化多糖,采用NaCl 梯度洗脱,可是这是在蒸馏水洗脱的时候出现一个很大的峰,怎么过回事?
2 用过的柱材用1 mol/L 的 NaCl 洗脱后,吸光值基本为0后,还要用NaOH 处理吗?还是直接平衡后就可以继续使用?
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1. 蒸馏水洗脱的时候出现一个很大的峰:是中性糖,如淀粉样多糖等。中性糖没有电荷,当然不吸附在DEAE上,在wash的过程就洗下来了。
2. 不用用NaOH处理,直接处理到平衡缓冲液中即可。但是如果有残留的色素的话,建议用0.5M的NaOH洗一下,然后是水,然后是平衡缓冲液。再说了,DEAE-纤维素很便宜,还需要重复使用吗?重复使用效果有时候就不好了
2楼2013-01-21 13:47:54
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