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求救蛋白质谱高手
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bubble1220
银虫
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注册: 2011-08-25
专业: 生物化学
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]
求救蛋白质谱高手
ESI-TOF不能打出蛋白分子量
样品体系: 20 mM PB buffer, pH 7.5
HPLC TFA作为离子对试剂进样100 μg
FA 作为离子对试剂进样5 μg
MS条件:end plate offset 163 nA
Capillary 7 nA
Nebulizer 0.8 bar
Dry gas 8.0 L/min
Dry temp 190℃
蛋白在TOF中得不到明显的m/z信号相应(如图)
m/z丰度图: 计算结果:
未命名-1.jpg
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1楼
2012-12-26 13:37:55
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bubble1220
银虫
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虫号: 1379298
注册: 2011-08-25
专业: 生物化学
已经换了甲酸的离子对试剂,还是不行啊。。。
会不会与蛋白本身的性质有关啊?
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3楼
2013-01-05 14:53:34
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organicsuper
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专业: 有机合成
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xbqewpq: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来分析版交流
2012-12-26 19:34:41
离子对试剂的量有点高啊,TFA在LC-MS中是一个强的信号抑制剂,即使是0.05%(体积)的也是这=,但是低于0.05%的TFA会使色谱柱的分离效果变差,所以楼主还是摸索色谱条件,
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2楼
2012-12-26 17:30:38
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