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songwang0516

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[求助] 3‘RACE出现了单引物扩增

如题，在做3‘RACE时加NUP出现了单引物扩增，刚开始还不确定，后来做了对照之后就是NUP扩增，不知怎么回事。各位大侠不知出现过这样的情况没，都是怎么解决的啊？？？

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1楼 2012-12-24 11:05:31

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jk_xdx

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【答案】应助回帖

★
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古可ぷ: 金币+1, 谢谢交流 2012-12-28 21:09:21

做3'用SMART? 重新设计一套引物,按照说明书上的原则来设计,再做做看.

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4楼2012-12-25 15:28:39

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bcy3383483

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【答案】应助回帖

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调节退火温度和变性及退火时间，实在不行就重新换一个3‘RACE接头

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2楼2012-12-24 11:29:04

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追梦的人1987

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【答案】应助回帖

★
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古可ぷ: 金币+1, 感谢热情细心分析 2012-12-28 21:09:13

很有可能是你的NUP与你的目的序列多个位点互补较多，你可以提高退火温度试试

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3楼2012-12-24 15:32:39

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songwang0516

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引用回帖:

4楼: Originally posted by jk_xdx at 2012-12-25 15:28:39
做3'用SMART? 重新设计一套引物,按照说明书上的原则来设计,再做做看.

恩，用的是smart试剂盒，但是70度的时候还是有啊

5楼2012-12-26 21:27:53

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