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海阔天空102

木虫 (正式写手)

[求助] DNA 变性与退火

有谁了解 ssDNA 高温变性 缓慢降到室温  以及 高温变性后 立即降到4度  保持一段时间 两种方式效果有什么不同？我的目标是ssDNA与相应的靶向分子或是蛋白相结合时，采用哪一种方式使得结合更有效呢？谢谢

[ Last edited by 海阔天空102 on 2012-12-5 at 17:20 ]
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1楼 2012-12-05 17:14:20
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lucias

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
海阔天空102: 金币+10 2013-05-13 10:10:37
简单地说就是缓慢降温DNA还可以杂交，迅速降温就几乎不可以了。就是复性的问题
https://baike.baidu.com/view/1017120.htm复性的解释
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10楼2012-12-26 09:21:01
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wolfghost

版主 (知名作家)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

为什么要采用这两种降温方法？目的何在？
哪种结合更有效，可以直接实验表现出来不？

楼主，我以外行人，但是旁观的心态提的问题，仅供参考哈
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大刀向鬼子的头上砍去！ChopJapstoDeath!
2楼2012-12-05 20:06:05
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shixiaba

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
海阔天空102: 金币+5, 博学EPI+1 2012-12-05 23:10:20
dna是用作是配体吧？一般都是室温退火呢，还是头一次听说要放到四度。楼主自己实验一下不就清楚了么。
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3楼2012-12-05 21:14:17
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海阔天空102

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wolfghost at 2012-12-05 20:06:05
为什么要采用这两种降温方法？目的何在？
哪种结合更有效，可以直接实验表现出来不？

楼主，我以外行人，但是旁观的心态提的问题，仅供参考哈

目的是更有效的结合，但目前没有发现特异性的结合，所以在考虑是什么原因。想到了DNA结构是不是需要activation，才能更有效的结合。问一下原理性或是经验性的知识
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4楼2012-12-05 23:08:05
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