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wangna029.

木虫 (小有名气)

[求助] 有关溶剂出现倒峰问题

用HPLC检测药物的有关物质,使用流动相作为溶剂,流动相中的水为纯净水,该物质的保留时间大约在12min左右,大概在不到三分钟出现一个倒峰,此倒峰被两个杂质峰包围,想问下为什么会出现倒峰,怎么解决,谢谢
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wjg6670

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来! 2012-12-05 18:30:29
wangna029.: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-18 22:09:39
用UV检测器出现倒峰正常,说明有一种物质在设定波长下,吸光度值比流动相还低。
解决办法是:一是想办法使流动相有更小的背景吸收,另外如果流动相中添加离子对试剂或缓冲溶液的话,想办法选择在检测波长处具有更小吸收的。例如习惯用乙酸调整酸度,在低波长会有大的背景吸收,那可以使用无机酸磷酸来调整。第二就是想办法使用长波长作为检测波长。第三怀疑试剂不纯,那就净化试剂。
具体问题具体分析。
2楼2012-12-05 17:34:35
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wangna029.

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wjg6670 at 2012-12-05 17:34:35
用UV检测器出现倒峰正常,说明有一种物质在设定波长下,吸光度值比流动相还低。
解决办法是:一是想办法使流动相有更小的背景吸收,另外如果流动相中添加离子对试剂或缓冲溶液的话,想办法选择在检测波长处具有更小 ...

谢谢啊,一直忘了回复。流动相倒峰很小,几乎可以忽略,但供试品的倒峰特别大。后来经过实验发现,是因为供试品是以盐酸盐的形式存在的,试验了与供试品同物质的量浓度的盐酸进样,发现盐酸的倒峰和供试品的倒峰基本是一致的。因为我们的检测波长是220nm,在低波长下检测,样品中的盐酸会产生大的倒峰,这个检测方法是药典中规定的,所以我们只有扣除掉供试品中的倒峰了。
3楼2012-12-18 22:07:06
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