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碧羽灵

银虫 (初入文坛)

[求助] 柱子堵了,什么原因?

我的色谱柱是新的,可是连续进了几次样以后柱前筛板发现堵了,我的样品浓度很高,进样后是超载的,这是按照药典上的方法做的,会不会是这个原因呢?还是其他的,求助各位
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魏宝红cool

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lhp123789 at 2012-10-25 10:37:45
估计是没有按照标准操作,流动相里有盐相,没有用有机相过度,

是大水相過度一下吧?这个问题我理解的不是很清楚,但就是觉得应该是水相過度,呵呵
4楼2012-10-25 17:25:51
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jessiejzx

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
听不到: 金币+1, 鼓励新虫发帖,欢迎常来分析版~ 2012-10-25 10:23:11
碧羽灵: 金币+2 2012-10-30 18:14:22
你安装预柱了吗?如果浓度很高,尽量安装预柱来保护柱子。堵了有可能是样品不干净,前处理没做好,比如植物样品有残渣、纤维素,动物样品有血丝、组织蛋白等等。所以要把前处理做好,进样前过0.45μm滤膜来确保干净。
另外,如果不是样品的原因,还有可能就是流动相。里边是不是加了盐?是不是容易堵的磷酸盐?这样走有机相盐容易析出,堵柱子。
淡泊以明志,宁静以致远
2楼2012-10-25 10:02:06
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lhp123789

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
估计是没有按照标准操作,流动相里有盐相,没有用有机相过度,
3楼2012-10-25 10:37:45
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lhp123789

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 魏宝红cool at 2012-10-25 17:25:51
是大水相過度一下吧?这个问题我理解的不是很清楚,但就是觉得应该是水相過度,呵呵...

柱子用完后一定要保存在纯的有机溶剂中,过渡的时候一般有20%-30%的有机溶剂,用纯水过渡对柱子不好,容易毁坏柱子。
5楼2012-10-26 08:55:43
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