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zlz-zm

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】用过离子对试剂的新柱子,柱压很高是什么原因? 已有3人参与

新买了一根柱子,选用的是含四丁基铵的磷酸缓冲盐:甲醇(95:5):只做了20个样品之后,柱压就从原来的100升到了130,于是赶紧用水-甲醇(95:5)来冲,结果柱压反而更高了!想上升甲醇的浓度至30%,结果柱压更高!后又换流动相冲,柱压反而下降了,但是柱效已经不好了,峰形明显很拖尾!!!
真是不明白是什么原因,已经确定不是系统管路的问题,就是柱子堵了,但是思前想后也不知道是什么原因?求助各位高人啊
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zhangxj519

金虫 (小有名气)

我觉得是柱子的原因,你用的是磷酸缓冲盐,比较溶液毁柱子,你就用没有磷酸缓冲盐的流动相好好冲冲柱子
2楼2010-10-14 20:20:41
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zlz-zm

新虫 (初入文坛)

就是用水-甲醇冲了好久都没什么效果,以前因为大批量做样品,已经用坏了两根柱子了,但是损害速度也没这么快....
3楼2010-10-15 08:19:06
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xiaoyz-08

新虫 (初入文坛)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
30%的甲醇肯定会柱压高,因为这时的甲醇-水粘度最大。你的流动相过滤了吗?是不是柱子污染了?你可以把柱子反向连接,用5%甲醇稍低的流速冲洗,然后再用甲醇冲洗,时间都稍微长一点也可以
4楼2010-10-18 10:16:59
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zlz-zm

新虫 (初入文坛)

现在终于弄明白了,可能是泵头的原因,泵头长时间用,已经发霉了有点,用硝酸处理呢。但是有新的问题,柱效不好的柱子,怎么用甲醇冲好呢?
5楼2010-10-18 15:08:12
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