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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 柱子出问题，请问是什么问题，怎么解决，谢谢
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hebauzjy

金虫 (小有名气)

[求助] 柱子出问题，请问是什么问题，怎么解决，谢谢

之前有人在waters液相用了高浓度磷酸做流动相，之后我的柱子柱效不太好了，后来又有人用了高浓度盐，我的柱子的柱压很高，请问是什么问题，怎么解决，谢谢
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该奋斗了
1楼2012-05-10 10:34:12
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

hhw_123

金虫 (正式写手)

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★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-10 18:00:51
不接色谱柱，查看是否仪器管路发生堵塞，解决方法0.05%硝酸冲洗；如不是，接上色谱柱，是色谱柱原因，用20%甲醇水或已经睡冲洗，或把色谱柱筛板拆下，用蒸馏水超声。如还不行，换柱子，呵呵
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6楼2012-05-10 13:56:28
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谷牛牛

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-10 18:05:49
引用回帖:
6楼: Originally posted by hhw_123 at 2012-05-10 13:56:28:
不接色谱柱，查看是否仪器管路发生堵塞，解决方法0.05%硝酸冲洗；如不是，接上色谱柱，是色谱柱原因，用20%甲醇水或已经睡冲洗，或把色谱柱筛板拆下，用蒸馏水超声。如还不行，换柱子，呵呵

一般在用磷酸盐作为高效液相的流动相时，很容易出现在进样后样品与蛋白出现共沉淀的情况，特别是磷酸缓冲盐不要超过50mml/L,PH不要超过10 ！一般的液相系统都有预柱，不会在柱子里边，若出现柱压升高，那就是溶解性的蛋白质吸附在柱子表面，一般很难冲洗干净，先用甲醇-水的流动相洗柱子，再用乙腈来冲洗！
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7楼2012-05-10 15:46:01
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谷牛牛

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2012-05-13 00:06:34
hebauzjy: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-05-14 13:24:42
引用回帖:
24楼: Originally posted by 九仙桃 at 2012-05-11 23:17:26:
预柱的压力检测了吗？正常吗？也有可能是预柱柱芯堵了，要是这样的话，换个柱芯就好了。

若不是预柱问题，就有点麻烦了了。其实进中药的提取液本来就会有很多大分子的化合物，就会吸附在柱子表面，第二在使用高浓度磷酸缓冲也做流动相的时候，柱床容易出现溶解的情况，特别是，若你的柱子是一般的，较便宜的柱子，而且老柱子用过一段时间的，柱子老化的情况就会加重。乙酸铵会破坏柱床，不宜长时间使用！
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25楼2012-05-12 00:01:07
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

国家高级公共营养师

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【答案】应助回帖

★
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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-10 21:46:21
需要把系统流路好好洗洗才行
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精益求精
2楼2012-05-10 10:39:14
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lijin79833

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
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豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-10 18:00:41
一般来说是柱子堵塞了，或是柱筛板脏了，如果柱子可以拆开，超声一下柱筛板，不好拆的话，倒过来冲冲，看是否有效果。
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用心做好药
3楼2012-05-10 11:03:22
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wojiazhuzhu

银虫 (正式写手)

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★
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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-10 21:46:31
应该是析出的盐被冲到柱子里了，导致柱子堵塞了
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4楼2012-05-10 11:10:31
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Garpio

木虫 (正式写手)

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★
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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-10 21:46:40
是不是盐洗出来了，用40℃，冲一个吧，管路也保温
能拆柱子最好
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5楼2012-05-10 11:16:51
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hhw_123

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 谷牛牛 at 2012-05-10 15:46:01:
一般在用磷酸盐作为高效液相的流动相时，很容易出现在进样后样品与蛋白出现共沉淀的情况，特别是磷酸缓冲盐不要超过50mml/L,PH不要超过10 ！一般的液相系统都有预柱，不会在柱子里边，若出现柱压升高，那就是溶解 ...

怎么会出现蛋白？不理解。溶剂与流动相如果不同，可能会出现盐析，使色谱柱堵塞。
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8楼2012-05-10 16:28:17
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谷牛牛

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-10 21:46:54
引用回帖:
8楼: Originally posted by hhw_123 at 2012-05-10 16:28:17:
怎么会出现蛋白？不理解。溶剂与流动相如果不同，可能会出现盐析，使色谱柱堵塞。

因为一般的沉淀剂，出去90%左右的蛋白，还有10%还溶解在处理液中！
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9楼2012-05-10 17:32:01
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xinyue2011

新虫 (小有名气)

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★
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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-05-10 21:47:00
柱子赌赛的话会出现这种情况 要洗柱子了 当然要首先弄明白是什么东西堵了 然后再采取措施
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10楼2012-05-10 19:31:03
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