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hebauzjy

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lijin79833 at 2012-05-10 11:03:22:
一般来说是柱子堵塞了,或是柱筛板脏了,如果柱子可以拆开,超声一下柱筛板,不好拆的话,倒过来冲冲,看是否有效果。

我的柱子无法拆开筛板,没法超声,反冲对柱子很不好吧
该奋斗了
21楼2012-05-11 22:40:35
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hebauzjy

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 谷牛牛 at 2012-05-10 15:46:01:
一般在用磷酸盐作为高效液相的流动相时,很容易出现在进样后样品与蛋白出现共沉淀的情况,特别是磷酸缓冲盐不要超过50mml/L,PH不要超过10 !一般的液相系统都有预柱,不会在柱子里边,若出现柱压升高,那就是溶解 ...

如果蛋白进了柱子,我该如何冲出来呢,我已经用甲醇-水:5:95,0.2ml/min冲了一天了,但是情况不太好,而且柱压还在慢慢的升高,弄得我很郁闷,请问怎么办呢?
该奋斗了
22楼2012-05-11 22:43:34
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hebauzjy

金虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by xinyue2011 at 2012-05-10 19:31:03:
柱子赌赛的话会出现这种情况 要洗柱子了 当然要首先弄明白是什么东西堵了 然后再采取措施

样品是板蓝根水提液,流动相先用了高浓度磷酸盐,后用了醋酸铵,我也不清楚怎么回事,现在用低流速高比例水冲柱子冲了一天,但是柱压在慢慢的升高,很郁闷啊,请问怎么办呢?
该奋斗了
23楼2012-05-11 22:47:08
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九仙桃

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢回复! 2012-05-13 00:06:17
预柱的压力检测了吗?正常吗?也有可能是预柱柱芯堵了,要是这样的话,换个柱芯就好了。
24楼2012-05-11 23:17:26
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谷牛牛

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
karl2100: 金币+1, 谢谢! 2012-05-13 00:06:34
hebauzjy: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-05-14 13:24:42
引用回帖:
24楼: Originally posted by 九仙桃 at 2012-05-11 23:17:26:
预柱的压力检测了吗?正常吗?也有可能是预柱柱芯堵了,要是这样的话,换个柱芯就好了。

若不是预柱问题,就有点麻烦了了。其实进中药的提取液本来就会有很多大分子的化合物,就会吸附在柱子表面,第二在使用高浓度磷酸缓冲也做流动相的时候,柱床容易出现溶解的情况,特别是,若你的柱子是一般的,较便宜的柱子,而且老柱子用过一段时间的,柱子老化的情况就会加重。乙酸铵会破坏柱床,不宜长时间使用!
25楼2012-05-12 00:01:07
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wanyiku

木虫 (正式写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by hebauzjy at 2012-05-11 22:27:39:
0.5%的稀硝酸会不会酸度太高啊,柱子能承受吗?纯水洗不行吧,我的是C18反相硅胶柱

我当时也是C18柱,不过半制备柱,你那是分析柱,那你在降低硝酸的浓度吧,10%的甲醇水溶液
加油,你是最棒的
26楼2012-05-12 08:57:36
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liupengp02

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 多谢指教! 2012-05-13 00:07:19
一个一个排查吧。先拆了柱子正常走看压力正常不,压力正常就是柱子出问题了,柱子出问题了就用大比例的水冲,再用大比例的甲醇冲,不得已不反冲。若管路出问题了,看是滤头没堵吧(滤头拆下异丙醇超、水超、甲醇超),不接柱子和检测器用纯水冲、甲醇冲,最后还不好用50%异丙醇低流速冲,最后还不好看是不是单向阀堵了,拆了检查。
以上是建议,还要结合其他异常问题综合考虑,问问客服。
你不懂我,我不怪你
27楼2012-05-12 16:12:52
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hebauzjy

金虫 (小有名气)

引用回帖:
26楼: Originally posted by wanyiku at 2012-05-12 08:57:36:
我当时也是C18柱,不过半制备柱,你那是分析柱,那你在降低硝酸的浓度吧,10%的甲醇水溶液

谢啦
该奋斗了
28楼2012-05-12 18:45:15
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hebauzjy

金虫 (小有名气)

引用回帖:
27楼: Originally posted by liupengp02 at 2012-05-12 16:12:52:
一个一个排查吧。先拆了柱子正常走看压力正常不,压力正常就是柱子出问题了,柱子出问题了就用大比例的水冲,再用大比例的甲醇冲,不得已不反冲。若管路出问题了,看是滤头没堵吧(滤头拆下异丙醇超、水超、甲醇超 ...

谢啦
该奋斗了
29楼2012-05-12 18:48:43
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hebauzjy

金虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-05-11 22:35:05:
走梯度的时候,压力会随流动相组分变化而变化,如果是梯度才发现压力偏高,先确定是否是梯度组分变化引起流动相粘度变化,譬如粘度变大,而使压力升高,这种情况属于正常现象。若确定的确是色谱柱压力偏高了,就 ...

不是梯度引起的压力升高,进样前需要先平衡柱子,那时候发现的柱压高了,异丙醇冲的浓度多少啊,有人说用0.05%硝酸冲柱子,可以吗?谢谢
该奋斗了
30楼2012-05-12 18:53:55
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