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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 转化后的菌液怎么保存
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添翼如虎

新虫 (小有名气)

[交流] 转化后的菌液怎么保存已有6人参与

我挑了转化完的单菌落进行液体扩大培养，培养完的菌液怎么保存呢？这批菌是要用来测序的
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yc652090251

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1楼2012-10-19 20:38:20
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
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短期保存的话可以加灭菌甘油放在+4°C。
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2楼2012-10-20 06:59:13
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yc652090251

金虫 (小有名气)
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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助 2012-11-28 15:37:49
70%甘油500ul，菌液500ul。-20度。
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低调做人好么~~
3楼2012-10-20 07:14:17
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seasonin

银虫 (小有名气)
★
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做菌保，与50%甘油500ul和500ul菌液混合，-40摄氏度保存
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4楼2012-10-20 09:42:23
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添翼如虎

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yc652090251 at 2012-10-20 07:14:17
70%甘油500ul，菌液500ul。-20度。

请问这个在加甘油之前要不要离心浓缩菌液呢？有的话转速和时间是多少呢
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5楼2012-10-20 10:22:02
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710002191

银虫 (小有名气)
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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助 2012-11-28 15:38:37
我认为会不会和细胞的冻存类似，细胞一般1000转5min就行了，应该都差不多吧，我们实验室那么做，活性还行，细胞一般冻的时候会温度逐渐下降的冻，对于菌我估计不用了吧，
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may
6楼2012-10-20 10:30:05
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flemingo

金虫 (小有名气)
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rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-28 15:59:42
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5楼: Originally posted by 添翼如虎 at 2012-10-20 10:22:02
请问这个在加甘油之前要不要离心浓缩菌液呢？有的话转速和时间是多少呢...

不需要，而且一般是用灭菌的30%甘油和菌液1:1混合，就是在1.5ml灭菌的EP管里先加0.5ml甘油，再加0.5ml菌液（一般培养时间超过12h）即可。
-20或-80冻存。-20可以保存一两个月，-80存个半年一年没问题。
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7楼2012-10-20 12:26:14
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yc652090251

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
5楼: Originally posted by 添翼如虎 at 2012-10-20 10:22:02
请问这个在加甘油之前要不要离心浓缩菌液呢？有的话转速和时间是多少呢...

测序的话不用浓缩菌液，浓度足够用了。吸取菌液前把菌液摇均。
   如果浓缩的话甘油浓度就不需要那么高了，30%就行。离心转数9000足够。
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低调做人好么~~
8楼2012-10-20 15:12:24
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407031345

铜虫 (初入文坛)
★
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直接放在冰箱是不行的哦？完蛋了  实验彻底做错了
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9楼2012-11-28 15:30:10
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