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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 酱油曲蛋白酶活测定
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sixiaoguang

铁虫 (小有名气)

[求助] 酱油曲蛋白酶活测定 已有1人参与

测定酱油曲酶活时分光光度计测定的空白样和待测样吸光度相同是怎么回事儿？
紫外法测定蛋白酶活性和福林酚法都试过了，急需！

必当重谢！
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初来乍到
1楼 2012-10-12 09:45:02
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xfyz102

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你说清楚点，空白样是没有酶的空白还是清水的空白，紫外法和福林本分法的结果是什么，没活性？
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云大好政治哦。
2楼2012-10-12 10:10:20
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zhoufeng1982

木虫 (著名写手)
知道了aaaa啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊
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3楼2012-10-12 10:10:40
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zwqytu

金虫 (初入文坛)
你不会是将酶失活后检测的吧？
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4楼2012-10-12 19:42:40
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sixiaoguang

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xfyz102 at 2012-10-12 10:10:20
你说清楚点，空白样是没有酶的空白还是清水的空白，紫外法和福林本分法的结果是什么，没活性？

空白样有酶，但是和酪素反应的时候已经被三氯乙酸灭活了；紫外和福林酚法测吸光度后样品和对照没有差别，您知道这是怎么回事儿吗？
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初来乍到
5楼2012-10-12 21:24:48
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sixiaoguang

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhoufeng1982 at 2012-10-12 10:10:40
知道了aaaa啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊

您知道了？请您给我说说行吗？
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初来乍到
6楼2012-10-12 21:25:34
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sixiaoguang

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zwqytu at 2012-10-12 19:42:40
你不会是将酶失活后检测的吧？

取培养好的固体发酵曲50℃烘干，称取3g固体曲加入20ml的蒸馏水后充分捣碎，室温下抽提2h，6000rpm离心过滤，滤液即为粗酶液

这样的酶液应该有活性的，我看到别人的文献都是这么写的
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初来乍到
7楼2012-10-12 21:27:40
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zhangyt7638

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-13 09:22:47
如果你的整个操作没问题的话，那应该就是你的粗酶液酶活很低，甚至没有活性，建议你从粗酶液上找原因，增加曲的浓度，提取后浓缩一下看看
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8楼2012-10-13 08:56:23
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majunyang

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酪蛋白配了多长时间了啊， 有可能底物酪蛋白放的时间长了
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.。。。。。。。。。。。
9楼2012-10-14 09:17:25
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sixiaoguang

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by majunyang at 2012-10-14 09:17:25
酪蛋白配了多长时间了啊， 有可能底物酪蛋白放的时间长了

您好，我用的是Casein Enzymatic Hydrolysate，这是酪蛋白吗？还是Casein是？
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初来乍到
10楼2012-10-14 18:09:35
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