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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 酱油曲蛋白酶活测定
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majunyang

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by sixiaoguang at 2012-10-14 18:09:35
您好，我用的是Casein Enzymatic Hydrolysate，这是酪蛋白吗？还是Casein是？...

东西没错，我是觉得酪蛋白溶液放的时间长了，按说在冰箱最多保存1个星期，我做的时候，时间长了空白就会有蓝色。
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.。。。。。。。。。。。
11楼2012-10-15 08:35:18
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xfyz102

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by sixiaoguang at 2012-10-12 21:24:48
空白样有酶，但是和酪素反应的时候已经被三氯乙酸灭活了；紫外和福林酚法测吸光度后样品和对照没有差别，您知道这是怎么回事儿吗？...

你要确定你的操作没问题，如果操作没问题的话可能性1，你的待测酶失活了，没有活性。可能性2，你的底物坏了，早降解了。
最后，如果是操作问题的话可能你的三氯乙酸有问题或没加对，导致空白其实也是有酶活的。
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云大好政治哦。
12楼2012-10-15 13:40:18
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cylzxb

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是你用的底物有问题，你用的是酶水解过的酪蛋白，是可以直接溶于水的，而用于测蛋白酶的酪蛋白是需要用氢氧化钠溶解的。你的空白吸光度是多少啊？
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13楼2012-11-08 20:24:03
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紫煜紫煜紫煜

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sixiaoguang at 2012-10-12 21:24:48
空白样有酶，但是和酪素反应的时候已经被三氯乙酸灭活了；紫外和福林酚法测吸光度后样品和对照没有差别，您知道这是怎么回事儿吗？...

空白样有酶，但是和酪素反应的时候已经被三氯乙酸灭活了，是拿这个做空白校准吗，可是明明这个的颜色很深啊，出来的不就是负值了吗？？
我不是很明白！能否说明一下
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14楼2015-03-17 10:40:43
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cy0207

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

固体发酵曲50℃烘干和6000rpm离心过滤的话酶活不会受影响吗？这样酶活不就低了
我也需要测发酵曲蛋白酶活~请问下你的福林试剂是自己配的还是买的？买的话需要稀释吗？稀释几倍？
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15楼2016-01-04 11:13:10
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JhonP

新虫 (初入文坛)
你好，我刚做蛋白酶，也遇到同样的问题，对照组和实验组的吸光度都很接近，请问最后问题解决了吗
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16楼2018-10-16 15:31:12
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