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majunyang

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by sixiaoguang at 2012-10-14 18:09:35
您好,我用的是Casein Enzymatic Hydrolysate,这是酪蛋白吗?还是Casein是?...

东西没错,我是觉得酪蛋白溶液放的时间长了,按说在冰箱最多保存1个星期,我做的时候,时间长了空白就会有蓝色。
.。。。。。。。。。。。
11楼2012-10-15 08:35:18
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xfyz102

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by sixiaoguang at 2012-10-12 21:24:48
空白样有酶,但是和酪素反应的时候已经被三氯乙酸灭活了;紫外和福林酚法测吸光度后样品和对照没有差别,您知道这是怎么回事儿吗?...

你要确定你的操作没问题,如果操作没问题的话可能性1,你的待测酶失活了,没有活性。可能性2,你的底物坏了,早降解了。
最后,如果是操作问题的话可能你的三氯乙酸有问题或没加对,导致空白其实也是有酶活的。
云大好政治哦。
12楼2012-10-15 13:40:18
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cylzxb

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是你用的底物有问题,你用的是酶水解过的酪蛋白,是可以直接溶于水的,而用于测蛋白酶的酪蛋白是需要用氢氧化钠溶解的。你的空白吸光度是多少啊?
13楼2012-11-08 20:24:03
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紫煜紫煜紫煜

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sixiaoguang at 2012-10-12 21:24:48
空白样有酶,但是和酪素反应的时候已经被三氯乙酸灭活了;紫外和福林酚法测吸光度后样品和对照没有差别,您知道这是怎么回事儿吗?...

空白样有酶,但是和酪素反应的时候已经被三氯乙酸灭活了,是拿这个做空白校准吗,可是明明这个的颜色很深啊,出来的不就是负值了吗??
我不是很明白!能否说明一下
14楼2015-03-17 10:40:43
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cy0207

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

固体发酵曲50℃烘干和6000rpm离心过滤的话酶活不会受影响吗?这样酶活不就低了
我也需要测发酵曲蛋白酶活~请问下你的福林试剂是自己配的还是买的?买的话需要稀释吗?稀释几倍?
15楼2016-01-04 11:13:10
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JhonP

新虫 (初入文坛)

你好,我刚做蛋白酶,也遇到同样的问题,对照组和实验组的吸光度都很接近,请问最后问题解决了吗
16楼2018-10-16 15:31:12
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