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nanzai

木虫 (著名写手)

小木虫学术委员会主席

[求助] 关于蛋白结合率测定的问题

有一篇文献上说“取肝素抗凝的人血浆 10ml 左右,3 支试管,各加入新鲜血浆 1ml,分别加入 0.05ml99Tcm-HMIBP 溶液(37KBq),37℃孵育 1.5-2h,每管加入 250g/L 的三氯醋酸 5ml,混匀,2000r/min,离心 5min,收集上清液;向沉淀物加入 100g/L 的三氯醋酸 5ml,混匀,2000r/min,离心 5min,收集上清液,重复此步骤两次。”
1、蛋白已经沉淀了,为什么还要第二次向沉淀物中加入 100g/L 的三氯醋酸 5ml再次沉淀,我觉得应该是再向上清液中(而不是沉淀物中)加入三氯醋酸,再次沉淀上清液中的沉淀才对?有没有虫友给我解释一下!
2、为什么两次加入的三氯醋酸浓度不一样?
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nanzai

木虫 (著名写手)

小木虫学术委员会主席

怎么没人和我的相关啊
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2楼2012-10-11 10:14:49
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yangwenwill

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
nanzai: 金币+2, 有帮助, 谢谢 2013-01-29 16:04:28
再次提取蛋白沉淀应该是为了预防第一次没有提取完全。
离梦最遥远的是懒惰
3楼2012-10-12 18:24:46
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