24小时热门版块排行榜    

查看: 2017  |  回复: 10

bububear0806

木虫 (小有名气)

[求助] 纯化金属蛋白酶时加了些EDTA,纯化好后如何除去

纯化一种金属蛋白酶,为了防止降解加了一些EDTA,纯化好后得除去,用超滤可以除去吗?EDTA会不会螯合在蛋白上下不来而影响蛋白活性?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MaoNaiJi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与.不过最好能直接回答。猜测答案是可以超滤除去,不会影响 2012-10-10 01:54:08
最简单的是透析带透析
2楼2012-10-10 00:34:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bububear0806

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by MaoNaiJi at 2012-10-10 00:34:39
最简单的是透析带透析

是透析简单还是浓缩管离心简单?这样真的可以除去吗?EDTA会不会螯合在蛋白的金属上下不来呢?谢谢~~
3楼2012-10-10 08:23:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by bububear0806 at 2012-10-10 08:23:57
是透析简单还是浓缩管离心简单?这样真的可以除去吗?EDTA会不会螯合在蛋白的金属上下不来呢?谢谢~~...

蛋白中没有金属离子的吧。再说了,蛋白石一个多级结构的,就算有,也不会是裸露的金属离子吧。个人见解
4楼2012-10-10 10:28:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bububear0806

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by dshlove at 2012-10-10 10:28:05
蛋白中没有金属离子的吧。再说了,蛋白石一个多级结构的,就算有,也不会是裸露的金属离子吧。个人见解...

有金属蛋白酶,蛋白中会有金属离子存在,不算裸露,但是有腔道可以接触到蛋白内的金属离子,所以不算安全~~EDTA螯合了金属离子后是就一直螯合着了吗?会解离吗?
5楼2012-10-10 17:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-10-11 06:45:43
bububear0806: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-11 08:43:03
一般金属酶加EDTA后就会把金属离子螯合,金属离子就不再与蛋白结合,透析或多次超滤可以把EDTA和金属离子去除。如果酶的活性与金属离子有关,失去金属离子的酶就没有了活性。
关注我关注的
6楼2012-10-10 19:01:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by bububear0806 at 2012-10-10 17:20:50
有金属蛋白酶,蛋白中会有金属离子存在,不算裸露,但是有腔道可以接触到蛋白内的金属离子,所以不算安全~~EDTA螯合了金属离子后是就一直螯合着了吗?会解离吗?...

嗯,螯合了基本很难解离的。
7楼2012-10-10 21:25:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bububear0806

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by zxc6884 at 2012-10-10 19:01:35
一般金属酶加EDTA后就会把金属离子螯合,金属离子就不再与蛋白结合,透析或多次超滤可以把EDTA和金属离子去除。如果酶的活性与金属离子有关,失去金属离子的酶就没有了活性。

明白了,谢谢~~
8楼2012-10-11 08:42:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bububear0806

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by dshlove at 2012-10-10 21:25:59
嗯,螯合了基本很难解离的。...

明白了,谢谢~~
9楼2012-10-11 08:42:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MaoNaiJi

金虫 (正式写手)

感觉生化基础知识不牢固的人太多了...zxc6884是正解
你纯化金属酶为什么要加EDTA?EDTA是螯合金属离子的 这样酶就不带金属离子了 有可能影响甚至丧失活性
10楼2012-10-12 01:12:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bububear0806 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +4 349506619 2026-08-28 4/200 2026-08-29 22:41 by alongwaytogo
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-29 21:22 by 4qO8zhfjr2AX
[基金申请] 面上意见出来了 +8 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 16/800 2026-08-29 20:45 by 黄鸟于飞Chao
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-29 17:22 by 4FFAWE8HcgUD
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 14:13 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 11:49 by jCd0dEvKHShX
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-29 11:18 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见