24小时热门版块排行榜    

查看: 1598  |  回复: 10

bububear0806

木虫 (小有名气)

[求助] 纯化金属蛋白酶时加了些EDTA,纯化好后如何除去

纯化一种金属蛋白酶,为了防止降解加了一些EDTA,纯化好后得除去,用超滤可以除去吗?EDTA会不会螯合在蛋白上下不来而影响蛋白活性?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MaoNaiJi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与.不过最好能直接回答。猜测答案是可以超滤除去,不会影响 2012-10-10 01:54:08
最简单的是透析带透析
2楼2012-10-10 00:34:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bububear0806

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by MaoNaiJi at 2012-10-10 00:34:39
最简单的是透析带透析

是透析简单还是浓缩管离心简单?这样真的可以除去吗?EDTA会不会螯合在蛋白的金属上下不来呢?谢谢~~
3楼2012-10-10 08:23:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by bububear0806 at 2012-10-10 08:23:57
是透析简单还是浓缩管离心简单?这样真的可以除去吗?EDTA会不会螯合在蛋白的金属上下不来呢?谢谢~~...

蛋白中没有金属离子的吧。再说了,蛋白石一个多级结构的,就算有,也不会是裸露的金属离子吧。个人见解
4楼2012-10-10 10:28:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bububear0806

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by dshlove at 2012-10-10 10:28:05
蛋白中没有金属离子的吧。再说了,蛋白石一个多级结构的,就算有,也不会是裸露的金属离子吧。个人见解...

有金属蛋白酶,蛋白中会有金属离子存在,不算裸露,但是有腔道可以接触到蛋白内的金属离子,所以不算安全~~EDTA螯合了金属离子后是就一直螯合着了吗?会解离吗?
5楼2012-10-10 17:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-10-11 06:45:43
bububear0806: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-11 08:43:03
一般金属酶加EDTA后就会把金属离子螯合,金属离子就不再与蛋白结合,透析或多次超滤可以把EDTA和金属离子去除。如果酶的活性与金属离子有关,失去金属离子的酶就没有了活性。
关注我关注的
6楼2012-10-10 19:01:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by bububear0806 at 2012-10-10 17:20:50
有金属蛋白酶,蛋白中会有金属离子存在,不算裸露,但是有腔道可以接触到蛋白内的金属离子,所以不算安全~~EDTA螯合了金属离子后是就一直螯合着了吗?会解离吗?...

嗯,螯合了基本很难解离的。
7楼2012-10-10 21:25:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bububear0806

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by zxc6884 at 2012-10-10 19:01:35
一般金属酶加EDTA后就会把金属离子螯合,金属离子就不再与蛋白结合,透析或多次超滤可以把EDTA和金属离子去除。如果酶的活性与金属离子有关,失去金属离子的酶就没有了活性。

明白了,谢谢~~
8楼2012-10-11 08:42:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bububear0806

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by dshlove at 2012-10-10 21:25:59
嗯,螯合了基本很难解离的。...

明白了,谢谢~~
9楼2012-10-11 08:42:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MaoNaiJi

金虫 (正式写手)

感觉生化基础知识不牢固的人太多了...zxc6884是正解
你纯化金属酶为什么要加EDTA?EDTA是螯合金属离子的 这样酶就不带金属离子了 有可能影响甚至丧失活性
10楼2012-10-12 01:12:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bububear0806 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 3/150 2026-02-08 03:05 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 3/150 2026-02-08 02:52 by vs90ilomwc
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 02:45 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:27 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:25 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:12 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 02:07 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 02:05 by vs90ilomwc
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 01:46 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:45 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:32 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:26 by vs90ilomwc
[教师之家] 有院领导为了换新车,用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 同年申请2项不同项目,第1个项目里不写第2个项目的信息,可以吗 +4 hitsdu 2026-02-06 4/200 2026-02-07 13:07 by jurkat.1640
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生|MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[基金申请] 面上项目申报 +3 Tide man 2026-02-01 3/150 2026-02-05 22:56 by god_tian
[硕博家园] 博士延得我,科研能力直往上蹿 +7 偏振片 2026-02-02 7/350 2026-02-04 17:36 by 陈氏帝国
[教师之家] 遇见不省心的家人很难过 +18 otani 2026-02-03 22/1100 2026-02-04 11:06 by tangmnt
信息提示
请填处理意见