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sjjsy7

银虫 (小有名气)

[求助] 原核表达载体构建时卡那浓度是多少?

最近在做原核表达,载体是PET-28a,可是老不成功,现在发现可能卡那浓度过高(我用的是100ug/ml,其实50ug/ml好一点),可是我不明白既然载体有抗性,那抗生素的浓度对菌株有什么影响?是不是过高就超过了耐受限度啊?希望大家解释一下,谢谢啦
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beishui

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
sjjsy7: 金币+1, 有帮助 2012-10-05 22:52:58
抗生素的浓度太高,肯定是不行的啊,kan一般用的是50ug/ml
宠辱不惊,看庭前花开花落;去留无意,望天上云卷云舒。
2楼2012-10-05 10:56:32
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trizol11

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
sjjsy7: 金币+1 2012-10-05 22:53:05
楼主说的有道理,浓度高是有影响的,人必须吃盐,吃多了受不了的道理和这个一样的。我前段时间做原核表达,AMP的浓度用的是100ug/ml。
按步骤,注意温度、浓度以及添加体积。这个实验就很简单了。祝你好运。
任重道远……
3楼2012-10-05 11:40:08
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
抗生素浓度过高增加代谢负荷。你还想让它大量表达次级产物,细菌也受不了的哇。
4楼2012-10-05 15:59:04
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sjjsy7

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by beishui at 2012-10-05 10:56:32
抗生素的浓度太高,肯定是不行的啊,kan一般用的是50ug/ml

好的!!
5楼2012-10-05 22:51:55
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sjjsy7

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by trizol11 at 2012-10-05 11:40:08
楼主说的有道理,浓度高是有影响的,人必须吃盐,吃多了受不了的道理和这个一样的。我前段时间做原核表达,AMP的浓度用的是100ug/ml。
按步骤,注意温度、浓度以及添加体积。这个实验就很简单了。祝你好运。

谢谢!!
6楼2012-10-05 22:52:06
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sjjsy7

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-05 15:59:04
抗生素浓度过高增加代谢负荷。你还想让它大量表达次级产物,细菌也受不了的哇。

哦,明白啦!!!
7楼2012-10-05 22:52:37
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